剪去幼嫩腋芽的叶片,用自来水冲洗干净,吸干水分后,用0.1%HgCl浸泡10分钟,无菌水冲洗3次,吸干水分并切除基部2mm部分接种。
也可采取旺盛生长的猪笼草顶端生长点以下3~4节较细嫩茎段作为外植体,切成单芽茎段,或取较成熟的茎段,去除叶片,叶柄和茎的交接处一定要切割圆滑平整。
以免消毒不彻底或消毒时伤害内部组织,再切成6~8cm长带2个芽的茎段,培养基需先做试验。
建议腋芽诱导培养基为MS 6-BA3mg/L NAA0.5mg/L VC1g/L CA1g/L AC0.20g/L 蔗糖30g/L 琼脂7g/L,或芽茎诱导培养基以1/2MS 6-BA1mg/L NAA0.05mg/L的液体培养。
或1/2MS培养,附加0.1mg/LIAA,0.5mg/L激动素,2.0mg/L的GA3,20g/L的蔗糖,8.0g/L琼脂(加入琼脂前,将培养基的pH调至5.8),培养1周后,芽开始萌动。
1个月可长成2cm高,经诱导的丛生芽,必须及时转接至丛生芽的增殖,否则丛生芽老化,影响下一阶段丛生芽增殖效果,丛生芽增培养最佳培养方案以MS培养基。
添加0.1mg/L的IAA,2.0mg/L的BAP,50.0mg/L的维生素C,25.0mg/L的柠檬酸,50.0mg/L蛋白氨基酸(Arginine),25.0mg/L硫酸腺嘌呤,500.0mg/L木炭,500.0mg/LPVP。
加入琼脂前将培养基pH调至5.8,琼脂一般用量为8.0mg/L,或按MS 6-BA1mg/L NAA0.1mg/L KT0.2mg/L 蔗糖30g/L 琼脂7g/L。