为了获得种子，必须在开花后的2至3天内进行人工授粉。
果实从授粉到成熟期一般需要3至5个月，太早收获会导致种子未成熟，而太晚则果荚可能开裂，影响种子的质量。因此，在蒴果即将成熟之前进行无菌播种效果最佳。
在无菌播种中，播种培养基通常采用MS培养基，并添加0.5mg/L的6-BA、0.5mg/L的NAA以及0.1%的活性炭。
大约20天后，种子就会开始萌发，30天左右便形成原球茎。在相同培养基上可以继续进行断代增殖，一个月内增殖率可达2倍以上。
接着，将芽和小植株转移到MS培养基上进行生根壮苗，大约45天后就可以长成完整的植株，可以出瓶并进行栽培。
试管苗出瓶后，可以定植在消毒后的水苔或者混合基质中，如树皮和火山石的混合物中，成活率通常可以达到90%以上。
大约经过6至8个月的时间，这些植株就可以移栽到盆中。移栽后的2至3年内，这些植株便可以开花。
2、组织培养
组织培养是另一种常用的穗花兰繁殖方法，它利用茎芽或根茎段作为外植体。
首先，外植体需要进行灭菌处理，然后在含有MS培养基、6-BA（1.2mg/L）、NAA（0.2～0.6mg/L）以及10%椰乳的培养基上培养约40天，以诱导出类原球茎。
