高效液相色谱分析法步骤,高效液相色谱十大步骤

首页 > 教育 > 作者:YD1662024-04-30 22:51:39

1). 严格过滤色谱纯流动相,根据需要选择不同的滤膜。

2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气20~30分钟。

3). 打开色谱工作站,连接好流动相管道,连接检测系统。

4). 有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵,直接在泵的出水口,用针头抽取。冲洗进样阀,冲洗时速度不要超过10ml/min。

5). 调节流量,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,一般不要超过2000psi。选用合适的流速。

6). 设定不同样品的检测器分析参数。

7). 等基线走稳即可进样分析,分析样品时对样品的前处理非常重要。

8). 关机时,先关检测器,泵不要关掉,应改用流动相冲洗泵,不同的流动相冲洗时间不同,一般冲洗30min,若是缓冲盐作流动相应先用水冲洗30min,再用纯甲醇冲洗。

9). 然后关液相泵。

10). 需要把进样阀冲洗干净,另把注射器等工具清理整洁。

11). 填写登记本,由负责人签字。

注意事项:

  1.首先必须是HPLC级的,这一条相信大家都做到了。

  2.脱气。由于流动相里含有微量空气,经泵的压力作用,会在流通池里产生气泡,这对分析产生一定的影响,如噪音增大,甚至于掩盖信号峰。因此,流动相在使用前必须经超声脱气20分钟以上。

  3.过滤。由于流动相里有很微小的垃圾,如不经过过滤,偶尔会卡在单向阀门中,从而产生压力波动。这一点很多用户不太注意,等到产生压力波动又不知道什么原因产生的。

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