凝胶色谱技术的原理,凝胶色谱技术的适用范围怎么确定

首页 > 教育 > 作者:YD1662024-05-16 04:26:08

1965年美国Waters公司从陶氏化学John C. Moore 获得凝胶渗透色谱(GPC)技术的授权,生产出了第一台商业化的凝胶渗透色谱仪GPC-100。自此,近几十年来市场上陆续出现了各种型号的凝胶渗透色谱仪,目前市场上已有多种型号的两用或多用凝胶渗透色谱仪,除Waters公司外,岛津、Agilent、Bio-Rad、TOSOH、PE等多种品牌的凝胶渗透色谱仪出售。

凝胶色谱技术的原理,凝胶色谱技术的适用范围怎么确定(1)


随着液相色谱技术的不断发展和进步,高压输液泵、凝胶填料、检测器以及计算机技术的发展壮大,凝胶渗透色谱仪的基本结构也不断的得到强化,准确、快速和自动化使它得到实验使用人员的信赖,得到越来越广泛的应用。下面简单介绍一下凝胶渗透色谱仪的基本结构和基本原理。

凝胶渗透色谱仪一般是由溶剂贮存器、过滤脱气装置、高压输液泵、进样装置、色谱柱及柱前过滤器、检测器、自动样品收集装置、记录仪和自动数据处理系统等部分组成。

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1.溶剂贮存器和过滤脱气装置

溶剂贮存器主要是用来贮存一定体积的流动相,贮存过程不得与溶剂发生化学反应,它的材质一般是玻璃、不锈钢或聚四氟乙烯等耐腐蚀材料。流动相溶剂中往往含有一些杂质颗粒,如果直接进样使用,势必会造成色谱柱或泵系统堵塞,所以进样前,一般采用0.22um或0.45um的微孔过滤膜过滤。另外,流动相溶剂可能还会溶有部分气体,当进入泵或色谱柱后,溶剂中的气体容易产生气泡,造成泵吸液的误差和分离效率降低等。因此进样前,也需要对溶剂脱气,对于低沸点或低粘度的溶剂,多采用真空泵抽吸脱气;对于沸点高或高粘度的溶剂,则采用加热到接近溶剂沸点以去除其中的气体。

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2.高压输液泵

高压输液泵是凝胶渗透色谱仪器的关键部件,它能把流动相溶剂以高压的形式连续、稳定地送入色谱系统,使样品在色谱柱完成分离过程。要求溶剂能以较快的速度通过分离效率很高的柱子。目前多数输液泵的最高工作压力能达到41160kPa,有的还能高至68600kPa,以至更高。同时,还要脉冲小。因此,为了完成高压输液的任务,对高压输液泵一般应满足以下的几个要求:

(1)无脉动的恒定流量,宽范围内连续可调,能连续供液不间断;

(2)高的输液压力,能直接测出并显示压力和流量大小;

(3)方便更换溶剂;

(4)能方便地实现程序控制;

(5)耐腐蚀性;

(6)体积小,方便使用维修;

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