凝胶色谱详细讲解,凝胶色谱层析步骤及注意事项

首页 > 教育 > 作者:YD1662024-05-16 04:44:56

凝胶色谱详细讲解,凝胶色谱层析步骤及注意事项(1)

【简介】

凝胶色谱法(Gel Permeation Chromatography,GPC)是一种新型的液体色谱,又名体积排除色谱(Size Exclusion Chromatography,SEC)、凝胶过滤色谱(GelFiltration Chromatography,GFC),是液相色谱的一个分支,是高聚物表征的重要方法之一。

1964年由J.C.Moore首先研究成功。在总结前人经验的基础上,结合大网状结构离子交换树脂制备的经验,将高交联度聚苯乙烯凝胶用作柱填料,同时配以连续式高灵敏度的示差折光仪,制成了快速且自动化的高聚物分子量及分子量分布的测定仪,从而创立了液相色谱中的凝胶渗透色谱技术。

【特点及应用领域】

操作简便快捷、进样量小、数据可靠且重现性好、自动化程度高等。

主要应用于聚合物分子量及其分布、聚合物的支化度、共聚物及共混物的组成、聚合物分级及其结构分析等。适于分析水溶液中的多肽、蛋白质、生物酶等生物分子。

【基本原理】

当被分析的试样随着淋洗溶剂引入柱子后,溶质分子即向填料内部孔洞扩散。较小的分子除了能进入大的孔外,还能进入较小的孔;较大分子则只能进入较大的孔;而比最大的孔径还要大的分子就只能留在填料颗粒之间的空隙中。因此,随着溶剂的淋洗,大小不同的分子就得到分离,较大的分子先被淋洗出来,较小的分子较晚被淋洗出来

图1 GPC的分离原理

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只依据尺寸大小分离,大组分最先被洗提出

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直径小于孔径的组分进入凝胶孔道

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