动物实验是医学研究中常用的方法和手段,在人类疾病的调查、防治等许多方面发挥着巨大的作用。目前国内外普遍认为实验动物质量的规范化直接影响科研水平,实验动物的水平要与科研水平相匹配。因此人们越来越重视实验动物的标准化。但医学科研论文中对实验动物应用的描述尚未引起足够的重视。描述不仅从一个方面反映了实验动物的应用,也反映了科研论文的规范化程度〔1〕,进一步影响论文的质量和传播。 笔者对1991年至1996年《中华医学杂志》、《中华内科杂志》、《中华结核和呼吸杂志》、《中华病理学杂志》、《中华肿瘤杂志》、《中华病理生理杂志》、《中国应用生理学杂志》、《解放军医学杂志》、《第三军医大学学报》、《第四军医大学学报》上发表的呼吸疾病论文进行调查,并随机抽取《》、《》、《》、《》和《与护理》等期刊中使用实验动物的文章,填写调查问卷,采用文献计量学方法进行统计分析。结果如下:
1. 10种期刊中呼吸疾病的论文数量差异明显,平均占总数的12.93%。其中,呼吸疾病在《中华结核和呼吸疾病杂志》中占80.31%,《中华内科杂志》中占11.57%,《中华肿瘤杂志》中占10.11%,《中华病理生理杂志》中占9.55%,相对较高。《中华病理杂志》占7.96%,《中华医学杂志》占4.81%,《中国应用生理学杂志》占5.54%。而《第三军医大学学报》占3.73%,《解放军医学杂志》占2.31%,《第四军医大学学报》占2.53%,相对较少。
2、约有1/4的研究论文是通过动物实验进行的,几乎涉及所有呼吸系统疾病,主要有阻塞性肺气肿、肺心病、支气管哮喘、呼吸衰竭、肺癌等。各期刊之间不平衡,《中华病理生理杂志》占75.25%,《中华应用生理学杂志》占70.27%,占比较高。《第四军医大学学报》为62.07%,《第三军医大学学报》为48.00%,《中华医学杂志》为32.76%,《解放军医学杂志》为18.52%,《中华结核和呼吸杂志》为13.15%。《中华内科杂志》和《中华肿瘤杂志》相对较少,分别为7.74%和8.60%。这与各期刊发表文章的侧重点有关。
3.理想的动物模型应规范、能准确复制。为此,应严格控制影响因素,追求一致性。影响复制的因素可分为两大类:动物因素和环境因素。动物因素包括遗传因素、性别、年龄、疾病因素等;环境因素包括营养、气候、理化、生活等因素。因此,在研究论文中应对这些因素进行描述。调查发现,文章标题是研究的核心,39.08%的文章没有注明实验动物的物种名称,部分文章使用了“大鼠”、“大鼠”等不规范的俗名;24.43%的文章没有说明实验动物的品系和品种;57.47%的文章既没有说明实验动物的来源,也没有说明其遗传背景;31.32%的文章没有说明性别、年龄和体重因素;39.13%的文章没有说明;13.79%的文章没有说明;部分文章实验动物数量过少,不符合统计要求。 11.78%的文章根本就没有提到实验动物的数量,当然,近交系动物可以超过统计要求,但必须达到一定的数量。
4.动物实验情况:98.56%的文章完全没有提及饲养方式,99.14%的文章没有描述实验环境,仅有1篇文章(占0.29%)提到了实验动物的合格证明。使用裸鼠进行实验的文章有5篇,其中仅有1篇提到了动物实验情况。
5.动物实验的处理方法:为了不影响实验结果和操作人员的安全,减少动物模型处理中因素的干扰,需要对实验动物进行妥善处理。调查发现,57.76%的文章没有记录麻醉剂,72.41%的文章没有记录宰*的方法。很多文章写到“宰*后……”,但没有讲到如何宰*。86.78%的文章描述了应用实验因素时所用的方法,61.49%的文章描述了所用动物模型的方法或依据。考虑到不同的模型结果会完全不同,应该描述如何实施实验因素,但调查发现,13.22%的文章没有提到。
6. 动物实验设计问题:动物实验设计也应参考并遵循临床试验设计的三大原则〔2〕:随机、重复、对照。根据实验动物的情况,有时最后还需采用双向方差分析。调查发现,45.40%的实验未采用随机分组,19.54%的实验未采用对照,所有文章均未采用双盲法或双向方差分析。因此,实验设计仍有改进空间。
客观地说,目前我国实验动物应用水平与发达国家(如美国、日本)相比还有一定差距,因为实验动物的应用受到国家政策法规、经济发展水平、科技水平等多重因素的影响。从随机选取的文章[3-5]可以看出,几篇呼吸系统疾病相关的国外期刊对实验动物的描述具有以下特点:(1)种属、品系描述明确;(2)强调来源;(3)体重明确;(4)等级明确;(5)饲养环境和实验环境明确;(6)性别明确;(7)饲养方式描述(如饲料种类、营养水平、光照方式、温度、湿度要求等);(8)所用动物数量准确;(9)详细描述动物健康状况;(10)对动物实验的治疗方法单独、明确说明;(11)均设有对照,有的采用双向方差分析。 当然,国外期刊的一些文章也存在不足,比如对动物年龄描述不清,没有采用双盲法等,发达国家目前都有专门的动物试验机构,可以保证试验结果的可靠性。
随着实验动物质量的不断提高,动物实验条件的不断改善,动物实验的应用越来越广泛。但很多动物实验研究论文往往对试剂生产地、产品批号描述得十分详细,却很少描述实验动物的情况,甚至一些学术水平较高的科研论文对实验动物的描述也十分简单。这种情况应引起科技人员的重视。