大肠菌群值有哪些,大肠菌群检测步骤图解

首页 > 经验 > 作者:YD1662022-11-14 09:57:03

一、参考标准

食品国标GB4789.3-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》定义,大肠菌群在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。

大肠菌群计数有两种方法:

方法一:MPN法,适用于大肠菌群含量较低的食品中大肠菌群的计数。

方法二:平板计数法,适用于大肠菌群含量较高的食品中大肠菌群的计数。

二、检验流程

(一)MPN法

大肠菌群值有哪些,大肠菌群检测步骤图解(1)

1、初发酵试验

每个样品,选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液,每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤,每管接种1 mL(,36℃±1℃培养24 h±2 h,观察倒管内是否有气泡产生,24 h产气者进行复发酵试验,如未产气则继续培养至48 h±2h,产气者进行复发酵试验。未产气者为大肠菌群阴性。

注意事项:液体样品可以选择原液;若是接种量需要超过1 mL,则用双料LST肉汤。

根据标准菌株对月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤培养基进行验证,结果如图一:

大肠菌群值有哪些,大肠菌群检测步骤图解(2)

a:大肠埃希氏菌ATCC25922,b:阴沟肠杆菌ATCC23355,

c:弗氏柠檬酸盐杆菌ATCC43864,d:粪肠球菌ATCC29212,e:空白对照

图一 月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤微生物质控结果

2、复发酵试验

用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环,移种于煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB)管中,36℃±1℃培养48h±2h,观察产气情况。产气者,即为大肠菌群阳性管。

根据标准菌株对BGLB肉汤培养基进行验证,结果如图二:

大肠菌群值有哪些,大肠菌群检测步骤图解(3)

图二 BGLB肉汤微生物质控结果

3、结果判定

根据证实为大肠菌群的阳性管数,查大肠菌群最可能数(MPN)检索表,报告每g (mL)大肠菌群的MPN值。

大肠菌群值有哪些,大肠菌群检测步骤图解(4)

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