流式细胞仪用途,流式细胞仪的原理结构及使用方法

图3 流动室与液流驱动系统

激光光源及光束成形系统：经特异荧光染色的细胞或者物质需要合适的光源照射激发才能发出荧光供收集检测。常用的光源有弧光灯和激光；激光器又以氩离子激光器为普遍。

光学系统：光源的选择主要根据被激发物质的激发光谱而定。汞灯是最常用的弧光灯，其发射光谱大部分集中于300～400nm，很适合需要用紫外光激发的场合。氩离子激光器的发射光谱中，绿光514nm和蓝光488nm的谱线最强，约占总光强的80%；氪离子激光器光谱多集中在可见光部分，以647nm较强。为了进一步使检测的发射荧光更强，并提高荧光讯号的信噪比，在光路中还使用了多种滤片。带阻或带通滤片是有选择性地使某一滤长区段的光线滤除或通过。

表1 常见荧光名称

信号检测与分析系统：经荧光染色的细胞受合适的光激发后所产生的荧光是通过光电转换器转变成电信号而进行测量的。光电倍增管（PMT）最为常用。PMT的响应时间短，仅为ns数量级；光谱响应特性好，在200～900nm的光谱区，光量子产额都比较高。流式细胞计中一般备有两类放大器。一类是输出信号辐度与输入信号成线性关系，称为线性放大器。线性放大器适用于在较小范围内变化的信号以及代表生物学线性过程的信号，例DNA测量等。另一类是对数放大器，输出信号和输入信号之间成常用对数关系。在免疫学测量中常使用对数放大器。

3.流式细胞术检测范围

（1）细胞功能

（2）细胞表面、胞浆、核的特异性抗原

（3）细胞活性

（4）细胞内细胞因子

（5）酶活性

（6）细胞受体

（7）细胞内钙离子

图4 流式样本检测范围

4.常见流式细胞术检测应用

表2 常见流式细胞术应用

图5 流式细胞术科研应用方向（1）