三种固定化酶方法各自的优缺点,酶分子固定化常用的方法

首页 > 上门服务 > 作者:YD1662023-10-27 06:16:38

使用G3玻璃过滤器真空抽滤,用蒸馏水将滤饼全部洗涤转移至烧杯并再次用40mL三氯甲烷萃取10min,再次抽滤,如此循环萃取、抽滤三次后收集剩余的木素,并于60℃下真空干燥至恒重,计算硫酸盐木素降解率,同时,收集滤液并转移至分液漏斗,静置、分层后收集有机相用于GC-MS检测。

三种固定化酶方法各自的优缺点,酶分子固定化常用的方法(5)

根据木素降解率和丁香醛、香草醛两种产物比例确定最佳的氧化剂,其中产物的比例是GC-MS谱图中各单酚类产物的面积占总面积的比例,表示木素降解产物的选择性和产物收率。

各因素优化实验设计及木素的催化转化处理

根据“4.2.3.3”选出的氧化剂及初步研究初选最优工艺,设计正交试验和单因素试验对一锅法催化转化木素工艺进行进一步的优化,以提高木素降解率和目标产物收率,获得最佳的一锅法催化转化硫酸盐木素的工艺条件。

1)正交试验

正交试验设计的6个因素依次为反应时间(A)、催化剂比例(固定化漆酶:固定化Co(salen),m:m)(B)、催化剂用量(C)、氧化剂用量(D)、反应体系pH(E),乙醇用量(F),每个因素设置5个水平,用L25(56)正交表安排实验,并记录每组实验的结果于正交表中,因素水平设计如表4.2所示。

三种固定化酶方法各自的优缺点,酶分子固定化常用的方法(6)

2)单因素试验

以正交试验得到的优选条件为基础,以木素降解率和香草醛比例为指标,进行反应时间、催化剂比例(固定化漆酶:固定化Co(salen),m:m)、催化剂用量、氧化剂用量、反应体系pH,乙醇用量6个因素的单因素实验,以实现工艺条件的进一步优化。

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单因素实验的因素水平依次为:选取反应时间为0~7h;催化剂比例(固定化漆酶:固定化Co(salen),(m:m))为0∶1、1∶5、1∶4、1∶3、1∶2、1∶1、2∶1、3∶1、4∶1、5∶1,1∶0;催化剂用量为0~11mg;氧化剂用量为0~0.6g;反应体系pH为4~9.5,乙醇用量为0~0.08mL。

3)木素的催化转化处理

一定量固定化漆酶、固定化Co(salen)催化剂或不加催化剂(空白实验),硫酸盐木素100mg,100mL缓冲液,一定量氧化剂,一定体积乙醇,室温(25℃)下反应一定时间,反应结束后,收集反应混合物,并在充分搅拌的条件下用40mL三氯甲烷萃取10min。

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