三种固定化酶方法各自的优缺点,酶分子固定化常用的方法

首页 > 上门服务 > 作者:YD1662023-10-27 06:16:38

使用G3玻璃过滤器真空抽滤,用蒸馏水将滤饼全部洗涤转移至烧杯并再次用40mL三氯甲烷萃取10min,再次抽滤,如此循环萃取、抽滤三次后收集剩余的木素,并于60℃下真空干燥至恒重,计算硫酸盐木素降解率,同时,收集滤液并转移至分液漏斗,静置、分层后收集有机相用于GC-MS检测。

产物GC-MS检测

硫酸盐木素降解产物用AgilentTechnologiesHP6890/5973气相色谱质谱联用仪检测,使用GC保存时间和NIST数据库进行化合物鉴定。GC测试条件:载气:He(流量1.0mL/min);温柱:4℃/min升至80℃(初始延迟5min)再升至290℃(保持40min);GC进样器和GC-MS接口保持在290℃。MS测试条件:质谱仪以电子电离模式(EI,50eV)操作。

实验结果与讨论

不同氧化剂对硫酸盐木素催化转化的影响

不同种类的氧化剂其氧化活性、选择性以及对催化剂催化活性产生的影响不同,在一锅法催化转化木素的过程中,使其对木素的催化转化产生的效果也存在巨大差异。不同氧化剂对硫酸盐木素单酚类催化转化降解产物的影响如表4.3所示。

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从表4.3可以看出,六种氧化剂的作用下,硫酸盐木素催化转化降解产物中均包含愈创木基型(G)、紫丁香基型(S)和对羟苯基型(H)结构单元单酚类化合物以及极少量联苯结构化合物,这说明各氧化剂存在下,木素的三种基本结构单元在固定化漆酶-固定化Co(salen)催化转化反应过程中均发生了降解,同时,说明氧化剂种类不同不影响硫酸盐木素降解产物的组成。

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值得注意的是,不同氧化剂下,虽然G型、S型、H型三种类型的单酚类化合物的整体比例情况均为G型最高,S型其次,H型最低,但各单酚类产物的比例及比例变化情况却不尽相同,这说明不同的氧化剂参与固定化漆酶-固定化Co(salen)催化转化木素时,G型单体的连接键更容易断裂,其次是S,H型单体。

同时,说明不同的氧化剂参与对产物选择性也不同。其中,不同氧化剂对硫酸盐木素催化转化降解率、单酚类降解产物香草醛及丁香醛比例的影响如图4.1所示。

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从图4.1可以看出,相同条件下,Na2S2O8、O2和H2O2氧化时香草醛、丁香醛比例及木素降解率均较高,分别达18%、8%和60%以上,其中,Na2S2O8氧化时香草醛和丁香醛的比例最高,分别为27.26%和16.48%,其可能的原因为Na2S2O8遇水迅速分解,放出氧而变为焦硫酸钠,氧提供固定化漆酶-固定化Co(salen)催化系统特别是固定化漆酶催化需要的氧源;同时焦硫酸钠保护漆酶酶活。

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