每一个大方格边长为1或2mm，则每一大方格的面积为1或4mm2，盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度为0.1mm，所以计数室的容积为0.1或0.4mm3。
在计数时，通常数四或五个中方格的总菌数，然后求得每个中方格的平均值，再乘上16或25，就得出一个大方格中的总菌数，然后再换算成1ml菌液中的总菌数。
下面以一个大方格0.1mm3有25个中方格的计数板为例进行计算：设五个中方格中总菌数为A，菌液稀释倍数为B，那么，一个大方格中的总菌数因1ml=1cm3=1000mm3，
同理，如果是16个中方格的计数板，设五个中方格的总菌数为A＇，则
三、器材
酿酒酵母菌悬液，血细胞计数板，显微镜，盖玻片，无菌毛细管。
四、操作步骤
1．稀释
将酿酒酵母菌悬液进行适当稀释，菌液如不浓，可不必稀释。
2．镜检计数室
在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污物，则需清洗后才能进行计数。
3．加样品
将清洁干燥的血细胞计数板盖上盖玻片，再用无菌的细口滴管将稀释的酿酒酵母菌液由盖玻片边缘滴一小滴（不宜过多），让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自行进入计数室，一般计数室均能充满菌液。（此处浙科版课本P73有误）注意不可有气泡产生。
4．显微镜计数
静止5分钟后，将血细胞计数板置于显微镜载物台上，先用低倍镜找到计数室所在位置，然后换成高倍镜进行计数。在计数前若发现菌液太浓或太稀，需重新调节稀释度后再计数。一般样品稀释度要求每小格内约有5—10个菌体为宜。每个计数室选4或5个中格中的菌体进行计数。
镜检计数方法：①方格内细胞的计数顺序为左上→右上→右下→左下。②压在方格线上的细胞只计左线和上线上的细胞数。③酵母细胞若有粘连， 要数出团块中的每一个细胞。④出芽酵母的芽体体积若超过细胞体积的1/2，则算独立个体。⑤计数总数不少于300个细胞。
5．清洗血细胞计数板
使用完毕后，将血细胞计数板在水笼头上用水柱冲洗，切勿用硬物洗刷，洗完后自行晾干或用吹风机吹干。镜检，观察每小格内是否有残留菌体或其他沉淀物。若不干净，则必须重复洗涤至干净为止。
6．注意事项
（1）进行计数前，应先将试管摇匀，目的是使酵母菌在培养液中混合均匀，以减少计数误差。
（2）显微镜计数时，对于压在小方格界线上的酵母菌，应取相邻两边及顶角计数。
（3）若一个小方格内酵母菌数量过多，难以数清时，则可将培养液稀释一定倍数后再计数。
（4）本实验无另设对照实验，酵母菌每天的数量变化可形成前后对照。
（5）血细胞计数板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用浸泡和冲洗的方法清洗。
五、实验报告
将结果记录于下表中。 A表示五个中方格中的总菌数； B表示菌液稀释倍数。
六、例题
例1 :在用血细胞计数板（2mm×2mm方格）对某一稀释50倍样品进行计数时，发现在一个计数室内（盖玻片下的培养液厚度为0.1mm）酵母菌平均数为16，据此估算10mL培养液中有酵母菌 个。（2x107）
例2:酵母菌的计数通常用血细胞计数板进行，血细胞计数板每个大方格容积为0.1mm3，由400个小方格组成。现对某一样液进行检测，如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应先 后再计数。若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有 个。（稀释 2×108）
例3 ：检测员将1 mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16＝400个小格组成，容纳液体的总体积为0.1 mm3。
