冻融胚胎移植(FET)技术已被各国的辅助生殖中心广泛应用。在FET前进行内膜准备的方案中,激素替代治疗(HRT)周期方案简单,时间灵活,妊娠率较稳定,因此获得了广泛应用。HRT-FET是人工补充激素模拟月经周期,待子宫内膜达到胚胎植入要求后,将冻融胚胎植入。但HRT周期患者自身完全没有黄体功能,子宫内膜的准备、早期妊娠的维持完全依赖于雌、孕激素的外源性补充,因此HRT-FET中合适的黄体支持方案是维持稳定的妊娠率和降低早期流产率的关键。
子宫内膜厚度测量
使用经阴道超声6.67 MHz 2D探头于孕酮转化日测量子宫内膜厚度。测量子宫内膜厚度时取子宫矢状面同时显示宫颈内口到宫底的内膜声像图,取两侧子宫肌层跟内膜交界处的最大距离。子宫内膜测量由经验丰富的超声医师进行,计量单位精确到0.1 mm。
胚胎评分及优质胚胎的定义
所有胚胎均采用玻璃化冷冻与快速复温法复苏。
孕酮转化内膜第4日复融卵裂期胚胎,孕酮转化内膜第6日复融囊胚,移植前按照胚胎发育速度、碎片程度及卵裂球均等度等对移植胚胎进行评分。
优质卵裂期胚胎为7~9卵裂球的Ⅰ级或Ⅱ级胚胎,细胞质均匀,形态规则,Ⅰ级胚胎:碎片<5%,Ⅱ级胚胎:5%<碎片<10%。
囊胚评分标准采用Gardner分级标准,根据囊胚腔形成分为6期。1期:早期有腔室囊胚,囊胚腔小于胚胎体积的1/2;2期:囊胚腔体腔大于或等于体积的1/2;3期:完全扩张囊胚,囊胚腔占据胚胎;4期:扩张囊胚,囊胚腔体积大于早期胚胎,透明带变薄;5期:正在孵出的囊胚,滋养层开始突破透明带;6期:孵出囊胚,囊胚完全从透明带孵出。
3~6期囊胚需对内细胞团和滋养外胚层细胞进行评分。内细胞团评分,A级:内细胞团紧密,细胞数量多;B级:内细胞团松散,数量较少;C级:内细胞团数量极少。滋养外胚层的评分,A级:细胞数量多,形成紧密排列的细胞层;B级:细胞数量少,排列松散;C级:滋养外胚层由稀疏的细胞组成。本中心评分≥4期(4BC)囊胚定为优质囊胚,移植优质囊胚。
HRT-FET方法
1. 从月经周期或者药物撤退性出血的第2~4日开始口服戊酸雌二醇(补佳乐,1 mg/片),4~6 mg/d×7 d;
2. 7 d后超声监测子宫内膜厚度并调整戊酸雌二醇剂量,最大剂量为8 mg/d,使用时间为11~20 d,内膜厚度增加慢的患者在使用补佳乐7~10 d后加用芬吗通(红色)(芬吗通,2 mg/片),1~2次/d。
3. 当子宫内膜厚度≥8 mm、血雌二醇水平≥150 ng/L后开始口服黄体酮胶囊或者黄体酮阴道缓释凝胶联合地屈孕酮进行内膜转化,转化第5日超声引导下行FET,移植1~2枚复苏的优质第5日或第6日囊胚,根据患者的治疗需要及经济状况制定黄体支持方案。
妊娠判断
1. 移植后12 d测血β-hCG≥10 U/L为生化妊娠;
2. 移植28~32 d进行阴道超声检查,超声下见宫内妊娠囊或流产物见绒毛或宫外见妊娠囊诊断为临床妊娠;
3. 明确宫内妊娠后持续黄体支持到孕10周逐渐减药至停药;
4. 12周内出现的阴道流血定义为早期出血;
5. 妊娠12周以内妊娠终止为早期流产;
6. 妊娠12周及以上,28周以下妊娠终止为晚期流产。