耶稣的门徒们都没有意料到老师会说这句话，一石激起千层浪，除了震惊，惊讶，然后彼此交头接耳，大眼蹬小眼，达芬奇把他们各自复杂微妙多变的表情刻画得惟妙惟肖！
因为叛徒就在这次晚餐的人中间，到底他是谁？彼此互相猜忌的表情，叛徒心中的恐惧等，这些门徒鲜明的性格特点，在这幅看似简单的人物画中一一展现，原型毕露！此时画中的气氛有静有动，无声的艺术语言，却情景交融，有声有色！
画面上为什么会出现一把刀，到底在暗示什么，是那个女孩想向耶稣表白一切，而这名叛徒做贼心虚，所以在桌子底下拿出了这把锋利的刀，以此作为威胁，大概是在说“谁敢说出这个秘密，我就马上要他命”，此时此刻，性命攸关，谁敢说呢……
画家把耶稣安置在画中间，是主宰，换句话说就是今天的最高领导者，虽然即将被捕，但安详、镇定自若、大义凛然、无所畏惧，与十二门徒的*动不安、猥琐、贼头贼脑，形成了鲜明的对比！正所谓正直善良的人身正不怕影子斜，而内心邪恶的人在正义面前无处遁形，丑态百出！
