最常用的方法是显微注射技术。方法的受体细胞多是受精卵。
将目的基因导入微生物细胞:
最常用的原核细胞是 大肠杆菌 ,其转化方法是:先用 Ca2 处理细胞,使其成为感受态细胞 ,再将 *表达载体DNA分子 溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程。
四、目的基因的检测和表达
1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子杂交(DNA-DNA)技术。
2.其次还要检测目的基因是否转录出mRNA,方法是采用分子杂交(DNA-RNA)技术。
3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是采用抗原—抗体杂交技术。
4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如生物抗虫或抗病的鉴定等。
1.3基因工程的应用
1.植物基因工程:抗虫、抗病、抗逆转基因植物,利用转基因改良植物的品质。
2.动物基因工程:提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。
3.基因治疗:把正常的外源基因导入病人体内,使该基因表达产物发挥作用。
4.基因诊断:又称为DNA诊断,是采用基因检测的方法来判断患者是否出现了基因异常或携带病原体。
1.4蛋白质工程的概念
1、基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质
2、概念:蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。
A 转录 B 翻译
3、蛋白质工程的基本途径:从预期的蛋白质功能出发→ 设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)
注意:目的基因只能用人工合成的方法