考点1 无菌技术与培养基的配制
1 无菌技术
(1)含义:在微生物研究、医疗操作、食品生产中采取的防止其他微生物污染的技术。
(2)常用方法:
2 培养基
(1)概念:在培养微生物时,根据微生物生长繁殖和代谢的需要,将各种营养物质混合在一起,配制成适合微生物生长、繁殖和产生代谢产物的营养基质——培养基。
(2)营养组成:一般都含有水、碳源、氮源、能源、生长因子和无机盐等。此外,还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
(3)种类:
①按物理状态划分:液体培养基、固体培养基、半固体培养基。
②按组成成分划分:天然培养基、合成培养基、半合成培养基。
③按应用功能划分:选择培养基、鉴别培养基、加富培养基等。
3 培养基的配制原则
(1)目的要明确:配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定需要配制的培养基种类。
(2)营养组成要协调:配制时应注意各种营养物质的浓度和比例。
(3)pH要适宜:培养不同微生物时所需的pH不同。在配制培养基时,需要根据微生物的类群调节pH,一般细菌适合于中性环境,放线菌适合于偏碱性环境,而酵母菌和霉菌适合于微酸性环境。
考点2 微生物的分离、纯化和计数
1 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
(1)分离原理:土壤中的细菌之所以能分解尿素,是因为它们能合成脲酶,这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到催化作用。
(2)统计菌落数目一般用稀释涂布平板法:
①统计菌落数目时,培养基表面生长的1个菌落,来源于样品稀释液中的1个活菌。为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。
②从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是(平均菌落数÷涂布的稀释液体积)×稀释倍数。
③利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是恰当的稀释度。
(3)实验流程:土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察→细菌的计数。2 酵母菌的纯培养
(1)纯化:分离得到的目标微生物,可用培养基进一步培养,得到由一个细胞或一群相同的细胞经过生长繁殖形成的后代,这个过程称为纯培养,也称为纯化。
(2)实验目的:运用平板划线法进行微生物的接种;使用干热灭菌法等技术完成无菌操作;观察酵母菌的菌落特征。
(3)实验流程:接种(平板划线法)→培养→观察记录→纯化培养。
考点3 果酒和果醋的制作
1 制作原理与发酵条件
2 制作流程
原料选择→原料处理→酒精发酵→醋酸发酵。
考点4 腐乳和泡菜的制作
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考点解读>>1 腐乳的制作
(1)制作原理:毛霉等微生物可以产生蛋白酶、脂肪酶,分解有机物。
(2)制作流程:让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。
(3)影响条件:
温度:控制在15~18℃;材料的用量:控制盐的用量,酒精含量控制在12%左右;卤汤。2 泡菜的制作
(1)菌种来源:附着在蔬菜上的乳酸菌。
(2)制作原理:在无氧条件下,乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
(3)制作流程: