革兰染色步骤及结果对照
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:
1)涂片固定。
2)草酸铵结晶紫染1分钟。
3)蒸馏水冲洗。
4)加碘液覆盖涂面染约1分钟。
5)水洗,用吸水纸吸去水分。
6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分。
7)蕃红染色液(稀)染1分钟后,蒸馏水冲洗。干燥,镜检。
革兰氏染色是一种常用的细菌染色方法,用于区分革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌。以下是革兰氏染色的步骤及其结果对照:
步骤:
1. 取一枚无菌玻璃片(或称为载玻片),将待染菌液滴于玻璃片上。
2. 用火培养架将玻璃片持在火焰上加热,直到液体完全干燥。
3. 将加热干燥的玻璃片放入革兰染色剂的第一瓶中(革兰碘复合物)浸泡1分钟,固定细菌细胞壁的颜色。
4. 用水冲洗玻璃片,以去除多余的革兰碘复合物。
5. 将玻璃片浸入第二瓶革兰染色剂(乙醇/乙醚溶液)中,颜色溶剂可以用酒精代替,浸泡30秒钟。此步骤将从革兰阴性细菌中去除革兰碘复合物。
6. 快速用水冲洗玻璃片,以停止乙醇/乙醚的作用。
7. 将玻璃片浸入第三瓶革兰染色剂(丽春红溶液)中,浸泡1分钟,使革兰阳性细菌细胞壁染成红色。
8. 用水冲洗玻璃片,使多余的染色剂冲洗掉。
9. 用纸巾轻轻地将玻璃片吹干,然后可以在显微镜下观察染色结果。
结果对照:
- 革兰阳性细菌:染色后的细菌呈紫色或暗紫色,这是由于细菌细胞壁的多层胞壁结构保留了革兰染色剂。
- 革兰阴性细菌:染色后的细菌呈红色或粉红色,这是由于细菌细胞壁较薄,无法保留革兰染色剂,但靠着后来的丽春红染色剂染色。
需要注意的是,染色结果可能会受到染色时间和操作技术的影响,因此对照样本的选择以及正确的染色步骤对于获得准确的结果是至关重要的。