白芨药用资源、组培快繁技术
白及经过块茎繁殖,易受种茎所带病虫害、病毒等感染,出现长势弱、病虫害严重、产量降低等退化现象。白及种子数量多且繁殖不传播病毒,但不易萌发,可通过种子培养进行无菌萌发后,结合组培快繁技术获得大量无病虫害植株,再通过练苗提高移栽种苗成活率。该方法不仅可以获得大量健康种苗,而且可避免反复块茎繁殖造成的种性退化现象。
1.无菌播种
采集白及成熟未开裂蒴果作为组织培养无菌外植体的材料。按照以下步骤进行无菌播种:①蒴果无菌处理:自来水洗去蒴果表面尘土,75%酒精浸泡并擦拭消毒1分钟,无菌水冲洗2次,0.1%氯化汞浸泡消毒8~10分钟,无菌水冲洗5-6次,取出后用无菌滤纸吸干多余水分;②培养基无菌处理:将1/2MS NAA 0.5mg/L的培养基高温、高压灭菌后冷却备用;③接种、培养:在超净工作台上,用无菌解剖刀将消毒处理好的蒴果切开,用无菌镊子将种子均匀接种在培养基表面;④将接种的培养瓶置于培养室培养,培养温度( 25±2)℃,光照度15 00~2000 Ix,光照12小时/天。
2.无菌萌发
白及种子培养1周后开始膨大萌发,2周可见绿色小点,后逐渐萌发成黄的的原球茎,原球茎逐渐变绿并分化出叶原基,1个月后长出叶片。
3。组培苗增殖
以无菌萌发获得的2-3叶无根组培苗为组培苗增殖材料。以MS 白糖3% 琼脂粉0.7% 活性炭0.1% 6-BA 1.0mg/L NAA 0.2mg/L为培养基,高温、高压灭菌后冷却备用。将无根组培苗转接到培养基上进行培养,培养条件为温度( 25±3)℃,光照度1500~ 2000 lx,光照12小时/天。
4.组培苗生根诱导
以增殖苗单株为生根诱导材料,1/2 MS 白糖2% 琼脂粉0.7% 活性炭0.l% NAA 0.2~ 0.5mg/L为培养基,在温度(25±3)℃,光照度1500~2000 lx,光照12小时/天的培养条件下进行培养,生根数达3-5条,生根率为100%[吉山花瑶]。
5.炼苗移栽
以诱导生根的组培苗为材料进行炼苗移栽。具体操作步骤依次为:①炼苗处理:为获得健壮的组培块茎,提高驯化移栽的存活率,需要将诱导生根的组培苗在室内敞口放置,3天后再移人大棚内敞口放置4天,进行炼苗处理;②驯化移栽:选取炼苗处理后百粒重大于43g的白及组培种球作为驯化移栽材料,在疏松、透气、保水的炼苗驯化基质,如木屑或蛭石 树皮(1:1)基质上进行驯化炼苗处理;③喷施营养液:对移栽的组培苗喷施有机水溶肥或叶面肥,增*培苗,促进白及组培苗的生长(图)。