肝癌在全球尤其是我国的发病率呈上升趋势，随着抗肿瘤药物的不断发展，化学治疗成为肿瘤治疗的主要方法之一，但大多数肿瘤化疗药物都存在着不同程度的毒副作用，在治疗肿瘤的同时，也给机体的正常组织、器官带来极大的伤害。
松针为松科(pinaceae)松属(pinus)植物的叶, 松叶中含有溶解人体内老化物、调整和促进身体组织机能、增进人体健康的物质, 并具有增强免疫力的作用, 有很高的药用价值和良好的应用前景。
一项实验采用水蒸气蒸馏法，从松针的嫩茎叶中提取挥发油，提取的挥发油为透明微黄液体, 芳香气味。
松针油对HepG2细胞的抑制率测定
松针油在各浓度对肝癌HepG2细胞的增殖均有一定抑制作用, 且呈时间、浓度依赖性,见图1。
松针油对肝癌HepG2细胞形态的影响
体外培养的HepG2细胞, 对照组和实验组进行形态学观察。细胞经不同浓度松针油作用后, HE染色下可见典型的细胞变圆, 细胞皱缩, 体积缩小, 细胞核深染, 染色质浓缩和断裂。固缩核的一侧, 呈环状、团块或新月体状, 以及细胞浆浓缩和“出泡”现象等变化(图3), 与正常细胞(图2)对照比较明显不同。
HE染色正常细胞 (10 ×40)
HE染色凋亡细胞 (10×40)
实验结果
松针油可显著抑制HepG2细胞生长, 抑制率与药物浓度正相关, 呈现明显的量-效和时-效关系。
松针油能引起HepG2 细胞凋亡, 且呈时间依赖性及剂量依赖性。电镜下可观察到核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡特征。
松针油在诱导细胞凋亡的同时伴随端粒酶活性下调和B淋巴细胞瘤-2基因（bcl-2）表达水平下降。
实验结论
松针油诱导肝癌HepG2细胞凋亡, 并抑制端粒酶活性, bcl-2参与了松针油诱导的肝癌HepG2细胞凋亡过程中端粒酶活性的调控。
利用气质联用仪鉴定了松针油中α-蒎烯含量是3.16%，α-蒎烯是主要的药用成分，并且能够抑制HepG2细胞增值。
在芳香疗法的精油使用中，芳疗师最常使用到的欧洲赤松精油，有效成分α-蒎烯的含量高达18.04%，因此可推论出，欧洲赤松精油的有效成分可一定程度抑制肝癌细胞增值。
欧洲赤松
英文名称：Pine
拉丁名称：Pinus sylvestris
植物家族：松科 松属
萃取方法：蒸馏法
萃取部位：干燥的枝叶和松木块
物理性状：淡黄色 略粘稠 味道浑厚
主要有效成分
α-蒎烯：18.04%；δ-杜松烯：11.29%；β-荜橙茄烯：9.00%
参考文献
【1】YANG Jie-bo，LI Ming，XIE Jing-jing，YANG Meng-die，LU Xin-shuo，WANG Fang，CHEN Wei-qiang( School of Basic Medicine，Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006，China) Effects of α-pinene extracted from pine needle on expression of miＲ-221 and its potential target genes in human hepatocellular carcinoma cells.
【2】WEI Fengxiang1,LI Mei-yu2,SONG Yuhong3,LIHongzhi1(1.Department of biology,Guang dong pharmaceutical university, Guang zhou 510006, China;2.Zhong shan school of Medicine, Sun Yat-senUniversity, Guang zhou 510060, China; 3.Guang zhou Medical college, Guang zhou 510925, China) Apoptosisand Activity Changes of Telomerase Induced by Essential Oil from Pine Needles in HepG2 CellLine.
