RPA磷酸化保护复制叉稳定性。J Cell Biol. 2014 Aug 18; 206(4): 493–507.
Primase是引发酶,用于合成RNA引物。T7噬菌体的引发酶是gp4,引物由2-4个核糖核苷酸组成。大肠杆菌引发酶是DnaG,合成26–29 个核苷酸的RNA引物。
真核生物的引物约9-11个核苷酸,引发酶由DNA聚合酶α(Polα)“兼任”。Polα是高度保守的异四聚体复合物,具有两个催化活性:最小的p48亚基(Pri1)中的具有primase活性,最大的p180亚基(Pol1)具有聚合酶活性,另外两个亚基是调节亚基。关于各种聚合酶的具体作用将在下一篇文章讨论。
增殖细胞核抗原(PCNA)最初被称为DNA滑动夹(DNA sliding clamp),认为它的作用是提高聚合酶的效率。随后的研究表明,它可与多种分子相互作用,从而参与多种代谢途径,包括DNA的复制与修复、DNA甲基化、染色质重塑和细胞周期调控等。
PCNA介导聚合酶转换绕过复制障碍。Biophys Rev. 2019 Jul 4:641-651.
Langston等人提出了一种机制,解释复制体如何绕过模板上的障碍进行复制。在此途径中,遇到障碍的Polε会失速并与DNA和PCNA解离,PCNA募集低保真的竞争性跨障碍合成(TLS)聚合酶,从而合成跨障碍的核苷酸。同时,Polε通过与GINS相互作用保留在复制叉上,通过障碍后再替换TLS聚合酶,继续正常复制。