图6 (A)为人类乳腺肿瘤,34个一毫米的外植体在96孔板上进行培养,分成一个控制群(n=17),用HPVAM 10% NaCI进行培养,测试组用HPVAM 10% Noni培养。两组介质均将pH值调至到7.4,并过滤除菌。不同处理手段和控制群差异是罹著的,P=0.006,使用Wilcoxon标记测试法测定。(B)是人类乳腺肿瘤,34个一毫米的外植体在96孔板上进行培养,分成一个控制群(n=17),用HPVAM 10% NaCl进行培养,测试组用HPVAM 10% Noni培养。两组介质均将pH值调至到7.4,并过滤除菌。小同处理手段和控制群差异是显著的,P=0. 002
经过七天的处理,外植体被固定、切片、使用TUNEL实验检测细胞凋亡,使用苏木精进行复染色。在玻片上的三个随机区域进行细胞凋亡检测(过氧化物酶染色)和细胞核完整性检测(苏木精染包)。
正如前面所提到的那样,内皮细胞可以静止或激活的状态存在。另一项研究显示内皮细胞的流动状态
表1在HPVAM中进行七天培养,去除生长介质,10个外植体在HPVAM和10%氯化钠的混合物中培养,10个其他的外植体在含有10%诺丽的HPVAM中培养的效果。
可以决定它们诱导细胞凋亡的敏感性。有一例实验就是内皮细胞通过蛋白酶抑制剂来诱导细胞的凋亡,内皮细胞增殖需要340倍的低浓度蛋白酶体抑制剂PSI以诱导细胞的凋亡17%。如果诺丽治疗产生的诱导细胞凋亡的机制类似于毛细血管处于汇合的状态内皮细胞,肿瘤已经建立的血管网可能能够抵抗诺丽的治疗,这将使诺丽能够有效地阻止新的血管的生成,而保留完整的成熟血管。然而,新形成的毛细血管的易感性如图3和图4所示,在新形成的血管网络,如肿瘤血管网中,存在高浓度的血管生长因子,血管内皮细胞很可能存在于有助于促进血管生成的环境中,从而增加了细胞凋亡诱导剂,正如诺丽的治疗效果。
诺丽抗血管生成功效的一种可能的机制,是通过与细胞表面的结构,如αv整合素的相互作用。另一
项研究显示,血管生成可能受多种多样的细胞因子所诱导,可以与至少两个不同的整合素介导的血管生成途径相关。诺丽可在碳水化合物等活性成分存在下,与某些生长因子相联合发挥萁竞争性抑制剂作用。最近的研究结果表明,有许多细胞因子的糖分子识别域及生物活性依赖于与碳水化合物的结合。由此可以推断整合素的拮抗剂可通过诱导新生血管细胞的死亡,进而促进肿瘤的消退。而这是否是诺丽真正的作用机制,目前仍在积极的研究过程中。
(选自英国《血管生成》,6:143 149。)
