4．空气
灵芝为好气性真菌，为保证其正常生长发育，培养过程中，加强通风、换气，减少有害气体。
5．光照
菌丝在生长阶段需要黑暗或微弱光照。子实体在生长阶段需要适量的散射光或反射光，忌直射光。
6．酸碱度
灵芝在pH值在3.0～7.5之间均可生长。最适pH值为5.0～6.0。
（一）灵芝菌种的培养
灵芝菌种培养过程包括纯菌种的分离与母种（一级菌种）培养、原种（二级菌种）生产、栽培种（三级菌种）生产等环节。培养、生产步骤主要有培养基（料）的制备、灭菌、消毒、分离、接种、培养、保存等。所用器皿、工具均要求消毒，做到无菌操作。
1．纯菌种的分离与母种培养
用组织分离或孢子分离法得到原始菌种，然后接种到培养基中培养得到母种。母种培养基多采用马铃薯—琼脂（PDA）培养基。
配方：去皮切碎的马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、维生素B12片、水1000mL。可制备120支试管培养基。取新鲜、成熟的灵芝用清水洗净，然后用75%的酒精或冷开水冲洗。在无菌条件下，切取菌盖或菌柄内部1小片黄豆大小的组织块。用接种刀将组织块切成小块接种于斜面培养基中央，置于24～25℃的温度下培养7～10天，当白色而均匀、生长旺盛的菌丝长满斜面时，即得母种。也可将孢子接种于斜面培养基上培养母种，也需要在无菌条件下。方法是取质优的已经开始释放孢子的灵芝子实体，消毒备用。收集孢子，取孢子接种于培养基上，经过培养，可获得一层薄薄的菌苔状营养菌丝，即母种。
2．原种和栽培种生产
将母种接种到培养料上，扩大培养原种，再用原种扩大培养栽培种，以满足栽培所需菌种的量。小量生产时，可用母种或原种直接接种栽培。
生产原种或栽培种的培养料配方与子实体袋（瓶）栽法的培养料配方相同，有多种配方。主要原料有木屑或棉籽壳，再加适当辅料制成混合培养料。配方1：麦粒99%，石膏1%，水65%；配方2：木屑78%，麸皮20%，石膏1%，黄豆粉1%；配方3：甘蔗渣75%，麸皮20%，蔗糖1%，石膏1%，黄豆粉1%；配方4：棉籽壳80%，麸皮16%，蔗糖1%，生石灰3%。
按照配方每100kg干料加水140～160kg，拌料均匀，装入菌种瓶内，至瓶高的2/3，在中间打一孔至近瓶底，洗净污物，用牛皮纸封口。高压或常压高温灭菌。冷却后接上菌种，大约1试管母种接原种5瓶，1瓶原种接栽培种50～60瓶。接种后放入培养室培养，需控制条件。25～30天，瓶内长满菌丝，即可接种栽培。
