DB53/T 684.6—2015
昭通乌天麻
第 6 部分：萌发菌、蜜环菌生产技术规程
2015 - 05 - 13 发布 2015 - 08 - 13 实施
ICS 11.120.10 B 38 中华人民共和国国家质量监督 检验检疫总局备案号：45779-2015
云 南 省 地 方 标 准
云南省质量技术监督局 发 布
DB53/T 684.6—2015
I
前 言
DB53/T 684《昭通乌天麻综合技术规范》分为10个部分：
——第 1 部分：质量要求； ——第 2 部分：产地环境； ——第 3 部分：种子质量要求； ——第 4 部分：种子生产技术规程； ——第 5 部分：萌发菌、蜜环菌质量要求； ——第 6 部分：萌发菌、蜜环菌生产技术规程； ——第 7 部分：种苗（白头麻）质量要求； ——第 8 部分：种苗（白头麻）生产技术规程； ——第 9 部分：商品麻（箭麻）生产技术规程； ——第 10 部分：初加工技术规程。 本部分为 DB53/T 684 的第 6 部分。
本部分是按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。
本部分由昭通天麻研究院提出。
本部分由云南省农业标准化技术委员会(YNTC07)归口。
本部分由昭通市天麻研究院负责起草，昭通市鑫宏优天麻开发有限公司、昭通市天麻特产局参加起
草。 本部分主要起草人：余显伦、王玉川、何海艳、杨成巧、彭佳华、田治蛟、刘金美、田孟华、张昌
飞、余扬举、刘旭燕、张公信、戴堃、郭友刚、刘大会。
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昭通乌天麻 第 6 部分：萌发菌、蜜环菌生产技术规程
1 范围
DB53/T 684的本部分规定了天麻共生萌发菌菌种、蜜环菌菌种的技术要求、菌种生产等。
本部分适用于天麻共生萌发菌菌种、蜜环菌菌种的规范化生产。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 DB53/T 684.5 昭通乌天麻 第5部分：萌发菌、蜜环菌质量要求
3 技术要求
3.1 技术人员
应有与菌种生产所需要的技术人员，包括检验人员。
3.2 场地选择
3.2.1 基本要求
地势较高，通风良好，排水畅通，交通便利。
3.2.2 环境卫生要求
清洁卫生，300 m内无禽畜舍，无垃圾（粪便）场，无污水和其他污染源（如大量扬尘的水泥厂、
砖瓦厂、石灰厂、木材加工厂等）。
3.3 厂房设置和布局
3.3.1 厂房设置和建造
3.3.1.1 总则
有各自隔离的摊晒场、原材料库、配料分装室（场）、灭菌室、冷却室、接种室、培养室、贮存室、
菌种检验室等。厂房建造结构和功能应满足菌种生产的基本需要。
3.3.1.2 摊晒场
地面平整，光照充足、空旷宽阔，远离火源。
3.3.1.3 原材料库
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防雨防潮、防虫，防鼠、防杂菌污染、远离火源。
3.3.1.4 配料分装室（场）
水电方便，空间充足。如安排在室外，应有天棚，防雨防晒。
3.3.1.5 灭菌室
水电安装合理，操作安全，通风良好，排气通畅，进出料方便，热源配套。
3.3.1.6 冷却室
洁净、防尘、易散热。
3.3.1.7 接种室
设置缓冲间，防尘换气性能良好，内壁和屋顶光滑，经常清洗和消毒。
3.3.1.8 培养室和贮存室
内壁和屋顶光滑，便于清洗和消毒；墙壁厚度适当，利于控温、控湿，便于通风；有防虫防鼠措施。
3.3.1.9 菌种检验室
水电方便，便于安装相应的检验仪器和设备。
3.3.2 布局
应按菌种生产工艺流程合理安排布局。
3.4 设备设施
3.4.1 基本设备
搅拌机、装瓶（袋）机、高压灭菌锅或常压灭菌锅、超净工作台或接种箱、磅秤、天平、调温设备、
除湿机、培养架、恒温箱、冰箱、显微镜等及常规用具。高压灭菌锅应每年通过经有关部门安全检验。
3.4.2 基本设施
配料、分装、灭菌、冷却、接种、培养等各环节的设施规模要配套。冷却室、接种室、培养室和贮
存室都要有调温设施。
3.5 使用品种和种源
3.5.1 品种
从昭通本地具有相应技术资质的供种单位引种，且种性清楚。不应使用来历不明、种性不清的菌种
和生产性状未经系统试验验证的组织分离物作为种源生产菌种。
3.5.2 种源质量检验
萌发菌母种每年在种源进入扩大生产程序之前，应进行菌种质量和种性检验，包括纯度、活力、菌
丝长势的一致性、菌丝生长速度、菌落外观等，验证种性。
3.5.3 种源移植扩大
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母种仅用于移植扩大原种，一支母种移植扩大原种不应超过6瓶（袋）；原种移植扩大栽培种不应
超过40瓶（袋）。
3.6 生产工艺流程
培养基配制→分装→灭菌→冷却→接种→培养（检查）→成品。
3.7 生产过程中的技术要求
3.7.1 容器
3.7.1.1 使用原则
每批次菌种的容器规格要一致。
3.7.1.2 母种
容器规格应符合DB53/T 684.5的规定。
3.7.1.3 原种
容器规格应符合DB53/T 684.5的规定。
3.7.1.4 栽培种
容器规格应符合DB53/T 684.5的规定。
3.7.2 培养原料
3.7.2.1 化学试剂类
化学试剂类原料如硫酸镁、磷酸二氢钾等，要使用化学纯及以上级别的试剂。
3.7.2.2 生物制剂和天然材料类
生物制剂如葡萄糖等，天然材料如壳斗科树叶、阔叶树木屑、麦麸等，要求新鲜、无虫、无霉、洁
净、干燥。
4 菌种生产
4.1 母种生产
4.1.1 时间要求
4.1.1.1 萌发菌
每年的8月至10月。一般在原种生产前的1个月～2个月。
4.1.1.2 蜜环菌
每年的10月至11月。一般在原种生产前的1个月～2个月。
4.1.2 培养基配制
4.1.2.1 萌发菌
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宜按照DB53/T 684.5附录A中A.1规定的配方。
4.1.2.2 蜜环菌
宜按照DB53/T 684.5附录A中A.2规定的配方。
4.1.3 分装
4.1.3.1 萌发菌
每只试管的分装量为试管长度的1/5至2/5，塞上棉塞或硅胶塞。
4.1.3.2 蜜环菌
每只试管的分装量为试管长度的1/3至2/3，塞上棉塞或硅胶塞。
4.1.4 灭菌
高压灭菌锅灭菌30 min（0.12 MPa～0.15 MPa，121 ℃～126 ℃），灭菌结束后蜜环菌母种须直立
放置，萌发菌母种趁热摆放斜面，斜面的长度为试管长度的1/3至2/3，冷却备用。
4.1.5 接种
在超净工作台上或接种箱内，用无菌操作法，用接菌铲挑取黄豆大小的母种，转接于试管斜面培养
基上。并贴标签。标签内容包括编号、来源、接种时间等。
4.1.6 培养与剔杂
4.1.6.1 萌发菌
将接种好的试管放置在25 ℃±1 ℃的恒温培养箱中培养，待萌发菌菌丝长满培养基表面（11 d～
17 d）。培养过程中及时剔出菌丝长速慢，稀疏、不匀、发黑、污染者。母种转管次数控制在5次内。
4.1.6.2 蜜环菌
将接种好的试管放置在25 ℃±1 ℃的恒温培养箱中，待蜜环菌菌丝长满培养基（16 d～23 d）。
培养过程中及时剔出菌丝长速慢，稀疏、不匀、发黑、污染者。母种转管次数控制在5次内。
4.2 原种生产
4.2.1 时间要求
4.2.1.1 萌发菌
每年的10月至翌年2月，一般在栽培种生产前3个月～4个月。
4.2.1.2 蜜环菌
每年的12月至翌年1月，一般在栽培种生产前2个月～3个月。
4.2.2 培养基配制
4.2.2.1 萌发菌
宜按照DB53/T 684.5附录A中A.3规定的配方。
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4.2.2.2 蜜环菌
宜按照DB53/T 684.5附录A中A.4规定的配方。
4.2.3 分装
用500 mL菌种瓶，装瓶至瓶肩处，中间打一通气孔，盖塞。
4.2.4 灭菌
高压灭菌锅灭菌120 min（0.12 MPa～0.15 MPa，121 ℃～126 ℃），冷却后备用。
4.2.5 接种
在超净工作台上或接种箱内，用无菌操作法，挑取长宽各1.5 cm左右的优质母种块（连同培养基），
移植接种于原种培养基上端中央，随即盖塞或扎口。并对同一批次的贴上标签。标签内容包括编号、来
源、接种时间等。
4.2.6 培养与剔杂
4.2.6.1 萌发菌
将接种好的菌种袋放置在25 ℃±1 ℃的恒温培养室中培养65 d～80 d，萌发菌菌丝即可长满整个
培养基。菌种培养期间，恒温培养室的湿度控制在60%±2%，每天进行通风换气。培养过程中及时剔出
菌丝长速慢，稀疏、不匀、发黑、污染者。
4.2.6.2 蜜环菌
将接种好的菌种袋放置在25 ℃±1 ℃的恒温培养室中培养35 d～50 d，蜜环菌菌丝即可长满整个
培养基。培养过程中，培养过程中及时剔出菌丝长速慢，稀疏、不匀、发黑、污染者。
4.3 栽培种生产
4.3.1 时间要求
4.3.1.1 萌发菌
每年的2月至3月，一般在天麻种子播种前2个月～3个月。
4.3.1.2 蜜环菌
每年的2月至4月，一般在生产用的2个月～3个月。
4.3.2 培养基配制
4.3.2.1 萌发菌
宜按照DB53/T 684.5附录A中A.5规定的配方。
4.3.2.2 蜜环菌
宜按照DB53/T 684.5附录A中A.6规定的配方。
4.3.3 分装
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4.3.3.1 萌发菌
用14 cm×28 cm塑料袋，装培养基至袋口距离为5 cm左右，中间打一通气孔，盖塞。
4.3.3.2 蜜环菌
用菌种瓶或菌种袋装袋至瓶肩处或距离袋口为5 cm左右，盖塞。
4.3.4 灭菌
高压灭菌锅灭菌120 min（0.12 MPa～0.15 MPa，121 ℃～126 ℃），冷却后备用。
4.3.5 接种
在无菌室内，用无菌操作法，挑取长宽各2 cm左右的优质原种块（连同培养基），移植接种于原种
培养基上端中央，随即盖塞或扎口。并对同一批次的贴上标签，标签内容包括编号、来源、接种时间等。
4.3.6 培养与剔杂
4.3.6.1 萌发菌
将接种好的菌种袋放置在25 ℃±1 ℃的恒温培养室中培养68 d～83 d，，萌发菌菌丝即可长满整
个培养基。菌种培养期间，恒温培养室的湿度控制在60 %±2 %。培养过程中及时剔出菌丝长速慢，稀
疏、不匀、发黑、污染者。
4.3.6.2 蜜环菌
将接种好的菌种袋放置在25 ℃±1 ℃的恒温培养室中培养33 d～45 d，蜜环菌菌丝即可长满整个
培养基。，培养过程中及时剔出菌丝长速慢，稀疏、不匀、发黑、污染者。
5 入库与档案记录
5.1 入库
完成培养的菌种及时登记入库。
5.2 档案记录
菌种生产各环节应进行详细的记录。 A
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