组织培养法就是利用植物体的器官、组织和细胞,通过无菌操作接种于人工配制的培养基上,在一定的温度和光照下,使其生长发育成为完整植株的繁殖方法。其培育方法是:
配制培养基。培养基是为培养植物提供营养的基质,是由植物生长所必需的大量元素、微量元素、有机物质、蔗糖、琼脂等物质组成,同时根据不同的培养目标,加入不同的植物生长调节剂。草莓组织培养一般选用MS培养基为草莓的基本培养基,加入3%蔗糖和0.5%的琼脂,各种物质按比例配制好,PH调至5.8后,装入瓶中,高压消毒后备用。
茎尖接种。每年的6-8月份从田间采摘匍匐茎顶端生长充分的生长点,或新长成的匍匐茎苗,把材料拿到室内,剥去外层大叶,先用自来水多次冲洗2-8小时后,再进行表面*菌。先用70%的酒精漂洗1分钟,再用0.1升汞消毒5-10分钟,然后移至超净工作台上用无菌水冲洗4次接种。接种时所取茎尖越小越好,但太小操作困难,成活率低,取材过大,超过1毫米,虽然成活率高,但脱除病毒作用降低。茎尖以带2-4个叶原基的生长点,长度为0.4-0.5毫米为宜。
取出的生长点接到启动培养基上。每瓶最好接种一个茎尖,这样可以防止个别茎尖污染造成的交叉感染。接种后将培养瓶放在培养室的培养架上,培养室的温度为25℃左右,光照强度为2000勒克斯,每天光照10小时。
初代培养。匍匐茎尖接入培养基,25天后茎尖开始分化生长。
继代培养。由初代培养得到的再生植株,可根据需要进行数次继代培养以增加试管苗的繁殖系数。通常25天左右继代一次。初代培养和继代培养的培养基为MS BA 0.5-1毫克/升。
生根培养。当继代培养的试管苗达到生产所需的数量时,开始进行组培苗的生根培养。方法是从继代培养瓶中取出幼苗,分成单株接种于生根培养基上,生根培养基为MS IBA 0.5毫克/升。经过10-20天的培养,幼苗长出了根系,就可以移栽到穴盘中了。通常把这种生了根的苗叫做试管苗。
试管苗的移栽。生根的试管苗需要移到一定湿度条件下的温室中栽培,直到苗长大发出5-6片叶为止,这一过程称为驯化培养。方法是从培养基中取出试管苗,洗去培养基后栽入穴盘中,移栽基质按土 珍珠岩1:1比例混合而成。栽后浇足水放置于温室中,并加盖塑料薄膜保温保湿,适宜的移栽温度是15℃-30℃,空气湿度80%-100%,棚内温度过高(>33℃)时再加盖遮阳网。15天后去掉塑料薄膜,这时可根据温室情况,每天或隔天喷水一次,防止过干,也不要过湿,以免烂苗。两个月左右即可移到大田栽植。
来源 吉林农村报
策划 孟繁杰 石巍 韩铁英
编辑 迟瑞冰