定量测试方法主要应用于药物、食品、化工等行业,用于定量测定某一特定物质或多种物质。在选择指定物质定量分析方案时,需要考虑多种关键因素,如样品体系、目标物的性质、样品矩阵、灵敏度和检出限、准确度和精密度、分析速度和成本,操作难度等。以上因素众多,故选择合适的定量分析方法尤其重要。
定量是指利用检测器的响应信号(色谱,光谱峰面积或峰高)与待测组分的量(质量或浓度)成正比定量。
有机目标物定量可按照下图选择定量方案:
图1 有机目标物定量仪器选择流程图
仪器方案定好后,为了定量更准确,还需要选择一种或多种适合目标化合物定量分析的方法,在实际操作中,最好对比不同方法的优缺点,并根据实验结果进行调整和优化。
常见的定量分析方法有:归一化法、外标法、内标法、标准加入法等。
一、 归一化法
将所有出峰组分的含量之和按100%计的定量方法,称为面积归一法。
归一法使用时需要满足三个条件
样品中所有组分都能从色谱柱流出
所有组分都能被检测器检出
能测定或查出所有组分相对校正因子
各组分含量的计算公式如下:
式中:C:含量 F:校正因子 A:表示峰面积
若样品中各组分的校正因子相近,可将校正因子消去,当样品中组分是同分异构体或同系物,Fi都很相近。
在计算时通常采用公式如下: