对内标物的要求
内标物是原样品中不含有的组分，否则会使峰重叠而无法准确测量内标物的峰面积。
内标物的保留时间应与待测组分相近，但彼此能完全分离(R≥1.5)。
内标物必须是纯度合乎要求的纯物质。
内标物需要准确称量，其加入量要与被测组分的含量接近。
案例3：指定内标标准品，为了排除样品基质干扰，用内标法定量时结果如下图
图4 氘代维生素U内标和维生素U色谱图
四、 标准加入法
标准加入法又称叠加法，实际是一种特殊的内标法。以待测组分的纯物质为内标物，加入到待测样品中，然后在相同的色谱条件下，测定加入内标物前后待测组分的峰面积，从而计算待测组分的含量。
在计算时通常采用公式如下：
