5.肽质量浓度的筛选
称取一定量大鲵肽粉末，加水溶解，按照肽-锌质量比25:1加入硫酸锌溶液，定容至40mL，在肽浓度分别为0.02，0.04，0.06，0.08，0.1g/mL，pH5.18，温度60℃，反应时间60min，沉淀剂为反应液体积的5倍，测定大鲵肽浓度对螯合率的影响。
6.沉淀剂乙醇用量的筛选
称取一定量大鲵肽粉末，加水溶解，按照肽-锌质量比25:1加入硫酸锌溶液，定容至40mL，肽浓度0.04g/mL，pH5.18，温度60℃，反应时间60min，沉淀剂为反应液体积的1，2，3，4，5，6倍，测定沉淀剂乙醇对螯合率的影响。
大鲵肽-锌螯合物的结构表征1.傅里叶变换红外光谱（FTIR）分析
大鲵肽与大鲵肽-锌螯合物的红外光谱测定采用KBr压片法。取2mg的固体样品粉末与200mg光谱纯级KBr混合并研磨，压制成透明薄片，在4000～400cm-1波段内对样品进行扫描，分辨率0.1cm-1，分析其特征峰。
2.紫外扫描分析
配制溶液浓度为0.1mg/mL的大鲵肽溶液和大鲵肽-锌溶液，以去离子水完成空白校准，用紫外分光光度计在190nm~400nm波长范围内扫描观察紫外吸收变化情况。
3.扫描电镜分析
通过扫描电子显微镜研究大鲵肽和大鲵肽-锌螯合物的形态结构，扫描条件如下：高压5kV，工作距离13.4mm，放大倍数范围为1-60k倍。
结果与分析
4.大鲵肽与硫酸锌质量比的筛选试验
在大鲵肽与硫酸锌质量比为5:1至40:1范围内，锌的螯合率随着质量比的增大而增大，在25:1时，螯合率达到81.94%，当比值继续增大时，螯合率呈缓慢上升趋势。螯合物得率随质量比的增大呈下降趋势。由上述结果可知，当肽锌质量比过低时，锌的螯合率较低，造成锌源的浪费；当肽锌质量比过高时，螯合物的得率较低，大鲵肽的有效利用率降低，造成原料的浪费。因此，肽锌质量比为25:1左右时比较合适，选择此比值作为后续试验条件。
5.pH的筛选试验
在肽质量分数为0.025g/mL，大鲵肽硫酸锌质量比为25:1时，不经pH调节，反应液pH为5.18，此时螯合率为83.06%；得率为58.63%。当pH过低时，氢离子会取代金属离子，影响螯合物的形成。随着pH的增大，氢氧根离子逐渐增多，导致生成氢氧化锌沉淀，不利于螯合物的制备，螯合率下降，这与富天昕和王晴等人的结果一致。综上以自然pH为后续实验条件。
6.反应时间的筛选试验
螯合率随着时间的延长呈现基本稳定的趋势（P>0.05），当螯合时间为60min时达到最大值，延长反应时间，其螯合物得率基本稳定（P>0.05），螯合率下降的主要原因是由于螯合环状结构不稳定，导致部分配合物解离。综上选取60min为后续试验条件。
7.反应温度的筛选试验
温度对螯合率有显著的影响，随着温度的升高，螯合率呈现缓慢上升趋势，当反应温度为60℃时，螯合率达到峰值且趋于稳定。温度对螯合物得率影响较小，综上选取60℃为后续实验条件。
8.肽质量浓度的筛选试验
当肽浓度为0.04g/mL时，螯合率达到最大值，螯合物得率呈现缓慢上升趋势。这是由于多肽浓度增大时，多肽活性反应基团与锌离子的碰撞概率增加，促进了螯合物的形成。因此选取0.04g/mL为后续实验条件。
