dab染色过度后如何处理,被染色的衣服怎样恢复

首页 > 大全 > 作者:YD1662022-12-18 00:58:32

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切片清洗

PBS洗涤是为了去除未反应的抗体和其他杂物,以减少非特异性反应引起的背景着色和杂物污染,因此应该充分洗涤,特别是一抗孵育后。一般使用PBS洗涤3次,每次5分钟。

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DAB显色

DAB显色液(3,3’-二氨基联苯胺)终产物为棕黄色或棕褐色,为免疫组化最常见的的显色液。DAB显色的棕黄色色原稳定性好,不溶于有机溶剂,可长期保存而不褪色。背景的深浅和特异性染色的深浅都可以由DAB孵育条件决定。DAB显色时间不是固定的,主要由显微镜下控制显色时间,到出现特异性染色较强而背景着色较浅时即可冲洗。

DAB显色时间很短(如几秒或几十秒)就立即出现很深的棕褐色,这可能说明一抗浓度过高,需要适当下调抗体浓度;若很短时间就出现深背景,有可能非特异性蛋白封闭不全,需要延长封闭时间;DAB显色时间很长(如超过10分钟)才出现阳性染色,可能是一抗体浓度过低或者封闭时间过长。贴片后梯度酒精脱水透明中性树脂封片后拍片即可。

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免疫组化图片分析

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安装方法:

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