马铃薯葡萄糖琼脂培养基是使用最频繁的培养基,简称PDA,主要用于真菌的分离和培养,有时也用于植物病原细菌的培养。
PDA培养基(马铃薯葡萄糖培养基)配方:去皮马铃薯200g 葡萄糖20g琼脂15—20g蒸馏水1000ml 自然pH。在PDA培养基配方中也可用蔗糖代替葡萄糖,这样配制的培养基也称为PSA培养基。
(1)称量。称量去皮马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂15--20g。提示:琼脂加入的量取决于琼脂的质量,质量好的15g就够了,质量差的应适当增加。另外,在夏天气温较高时,适当增加用量。
(2)将马铃薯切成小块,放入锅中,加水1000ml,煮沸20~30min。用纱布滤去马铃薯残渣。
(3)将马铃薯滤液放回锅中,加入琼脂,加热熔化。提示:在琼脂熔化的过程中,需要用玻璃棒不断搅拌,并控制火力不要使培养基溢出或烧焦。
(4)加入葡萄糖。葡萄糖溶解后,加入适量的水以补充加热过程中损失的水分,定容至1000ml。提示:通常在制作培养基的锅内用红蓝铅笔标记出不同体积的刻度,如1000ml、2000ml等,在定容时直接将水加至已标记的刻度即可。
(5)分装。根据不同的实验目的,可将配制的培养基分装于试管内或三角瓶内。分装试管,其量为管高的1/5,灭菌后制成斜面。分装三角瓶的容量以不超过三角瓶容积之一半为宜。
(6)加塞。在管口或瓶口塞上棉塞。棉塞要用未脱脂的经弹松的棉花,棉塞可过滤空气,防止杂菌侵入并可减缓培养基水分的蒸发,故在植物病理学研究工作中普遍使用。
(7)包扎。加塞后,将试管用线绳捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳扎好。用记号笔注明培养基名称、配制日期、组别、制作人等。
(8)灭菌。将上述培养基以0.103MPa,121℃,高压蒸气灭菌20~30min。可以用家用高压锅上汽后灭菌1小时。
(9)搁置斜面。将灭菌的试管培养基冷至50℃左右(以防斜面上冷凝水太多),将试管口端搁在玻棒或其他合适高度的器具上,搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。
培养基经灭菌后,必须放在37C温箱培养24h,或常温下放置几天后无菌生长者方可使用。
灰藻生物
专注于微生物、细胞和分子生物资源的开发和交流
兼有ATCC原装菌株
和ScienCell原代细胞代理等技术服务
致力于为任何有需要的客户
提供专业、稳定、优质的生物资源
争做“生命科学研究的好伙伴”