（四）载脂蛋白的组成
血浆脂蛋白中的蛋白质部分称载脂蛋白（apoprotein, apo），迄今已从人血浆中分离出18种之多。
主要有apoA、B、C、D、E等五类，其中apoA又分为apo AI、AⅡ、AⅣ；apoB又分为B100及B48；apoC又分为CⅠ、CⅡ、CⅢ。
不同的脂蛋白含不同的apo, 它们主要功能是结合和转运脂质。此外还调节脂蛋白代谢关键酶活性，参与脂蛋白受体的识别等。
如apo AI激活卵磷脂胆固醇酰基转移酶（lecithin cholesterol acyl transferase, LCAT），识别HDL受体。apoAⅡ稳定HDL结构，激活肝脂肪酶促进HDL的成熟及胆固醇逆向转运。
apoB100能识别LDL受体。
apoCⅡ是脂蛋白酯酶的激活剂，促进CM和VLDL的分解。
apoCⅢ则抑制LPL的活性，并抑制肝细胞apo E受体。
apo E参与LDL受体的识别。
apo D促进胆固醇及TG在VLDL、LDL与HDL间的转运。
（五）脂蛋白受体
脂蛋白受体是一类位于细胞膜上的糖蛋白。它能以高度的亲和方式与相应的脂蛋白配体作用，从而介导细胞对脂蛋白的摄取与代谢，进一步调节细胞外脂蛋白的水平。
已有很多种，主要有LDL受体、残粒受体（remnant receptor）及清道夫受体（scavenger receptor）。
脂蛋白与脂蛋白受体的作用：不仅是运送脂蛋白至细胞所必需，也是从血和外周组织中有效清除具有潜在致动脉粥样硬化的脂蛋白所必需的。
LDL受体：不仅能识别ApoB100，也可识别ApoE，在细胞结合、摄取和降解LDL及其它含ApoB100的脂蛋白过程中起中介作用，对维持细胞和全身胆固醇平衡起重要作用。
残粒受体：能识别ApoE，是清除血液循环中CM残粒和β-VLDL残粒的主要受体，它也能结合含ApoE的HDL。
清道夫受体：主要存在于巨噬细胞表面,介导修饰LDL(包括氧化LDL和-VLDL)从血液循环中清除。
血脂、脂蛋白及载脂蛋白测定方法及临床意义（节选）（一）血清总胆固醇测定
胆固醇是人体重要的脂类成分，具有重要的生理功能，如合成类固醇激素，维生素D3胆汁酸，并构成细胞膜成分，TC包括FC（1/3）和CE（2/3），胆固醇与动脉粥样硬化有密切关系，故胆固醇测定是最常用的实验室检测项目之一。
TC测定方法很多，约200多种，分为化学测定法、酶法、气相色谱法、高效液相色谱法、核素稀释质谱法（决定性方法）。
酶法操作简便，快速，试剂无腐蚀性，适合于自动化分析，但也存在有一些不足，CEH对胆固醇水解不完全，表面活性剂影响CEH活性，黄疸血清中过高的胆红素可还原H2O2使结果偏低。
【临床意义】血清TC含量受年龄、性别、饮食和运动等因素的影响。
（1）20岁以上随年龄↑而↑，70岁以后则有下降趋势。
（2）20～40岁阶段男性高于女性，但女性绝经后则高于男性。
（3）城市人群高于农村人群，与饮食和运动有关。
（4）脑力劳动者高于体力劳动者。
病理性高胆固醇血症 原发性高胆固醇血症，糖尿病、胆道阻塞、肾病综合症、甲状腺功能减退。
病理性低胆固醇血症 严重贫血、甲亢、营养不良。
（二）血清甘油三脂测定
TG是有一分子甘油与三分子脂肪酸组成的化合物，主要存在于VLDL和CM中临床化学中往往以测定甘油代表TG的含量。TG的测定方法很多，如气相色谱法、高效液相色谱法、红外分光光度法。但上述方法需特殊的仪器设备和技术，故一般只用于研究工作中。临床实验室主要用化学法和酶法。
【临床意义】血清TG一般随年龄增长而升高，体重超标者往往偏高。
（1）病理性增高 原发性高脂蛋白血症、肥胖症、糖尿病、肾病综合症、脂肪肝、妊娠后期。
（2）病理性降低 甲亢、肾上腺皮质功能减退、严重肝功能损伤。
（三）血清高密度脂蛋白胆固醇测定
测定步骤包括：
① HDL的分离；
②测定HDL中胆固醇。
HDL的分离方法有：超速离心法、凝胶过滤法、免疫化学法、电泳法、沉淀法。
临床实验室常用沉淀法。沉淀剂一般为二价阴离子和多价阴离子。
如：肝素-Mg2 、硫酸葡聚糖- Mg2 、磷钨酸- Mg2 、聚乙二醇（PEG）等。
如：磷钨酸- Mg2 选择性地沉淀血清中的LDL和VLDL，经离心上清液中保留HDL，然后用酶法测定上清液中的胆固醇含量，即代表HDL中的胆固醇。
（四）血清高密度脂蛋白亚组分胆固醇测定
HDL有三个亚类（HDL1、HDL2、HDL3）最近的研究工作表明，HDL2亚类与冠心病危险度的相关程度比总HDL-C更密切。
高密度脂蛋白亚组分的分析方法有超速离心法、柱层析法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法、多价阴离子分级沉淀法。
其中多价阴离子分级沉淀法具有快速、经济、简便更为实用，是目前临床实验室最常用的方法。常用的沉淀剂有硫酸葡聚糖- Mg2 、聚乙二醇（PEG）。
原理：用PEG做沉淀剂，以不同浓度的PEG在不同pH条件下分别将VLDL和LDL（沉淀剂Ⅰ 95g/L PEG，Ph6.5）HDL2（沉淀剂Ⅱ 170g/L PEG，Ph7.5）沉淀，上清液中只含有HDL（沉淀剂Ⅰ）和HDL3（沉淀剂Ⅱ），然后用酶法测定HDL-C和HDL3-C，并以HDL-C减去HDL3-C的差即为HDL2-C的含量。
（五）血清载脂蛋白AⅠ及B测定
脂蛋白中的蛋白质部分称为载脂蛋白（apolipoprotein，Apo），可分为A、B、C、D、E、F、G、H八类，其中ApoA，B，C还有亚类。
ApoAⅠ是HDL的主要蛋白质，占HDL蛋白质的85%左右，它的血清浓度可代表HDL水平，ApoB是LDL的主要蛋白质，占LDL蛋白质的97%左右，ApoB浓度主要反映LDL水平。
Apo的测定方法主要有三类：
①层析分离，然后再按一般蛋白质定量；
②电泳分离后经染色光密度扫描定量；
③各种免疫分析法。
层析法操作麻烦，一般只用于研究；电泳法简便灵敏，但各类Apo染色性能不一致，重复性不好；免疫法特异性好，灵敏度高，不需预先分离脂蛋白，适合临床实验室的应用，但需特异抗血清。
目前常用的免疫学方法有：
1.单向免疫扩散法（RID） 方法简单，但需时间长，灵敏度较低。
2.火箭免疫电泳法（IE） 比RID快速、灵敏，抗血清用量少。
3.免疫比浊法 测定抗原抗体复合物形成而产生的混浊，方法简便、快速，适合于自动分析仪，灵敏度高于火箭电泳法，免疫比浊法又分为：散射比浊法和透射比浊法。
4.酶联免疫吸附法（ELISA） 需制备指示酶与Apo或其抗体的交联物（现有商品化试剂盒）和酶标仪。
5.放射免疫法（RIA） 用核素标记抗原作为示踪物，灵敏度可达3～5μg。
6.荧光免疫分析法（FIA）
7.化学发光免疫法（CLIA）
8.免疫透射比浊法：是根据光线通过特异性抗原抗体免疫复合物溶液时被吸收和散射，使透射光减弱，减弱程度与免疫复合物含量成正比，即与抗原含量成正比。
（六）血清脂蛋白电泳
临床实验室常用的支持介质有醋酸纤维薄膜和琼脂糖凝胶。
1.血清脂蛋白醋酸纤维薄膜电泳
以醋酸纤维薄膜为支持介质，血清脂蛋白经电泳分离，然后用臭氧氧化，使脂蛋白中的不饱和脂肪酸的双键断裂生成醛，再用亚硫酸品红染色，即生成紫红色区带。
2.血清脂蛋白预染琼脂糖电泳
血清脂蛋白经饱和苏丹黑B预染后，以琼脂糖凝胶为支持介质，进行电泳分离，即可得到清晰的兰色区带。
凝胶浓度一般为0.5%，超过1%，β-Lp与preβ-Lp不易分开，＜0.5%，凝胶机械强度太低。
血清：染料为9：1，染料过多稀释标本，而且染料中乙醇会引起蛋白质变性，影响分离效果。
结果判断，直观区带的着色深浅，宽窄，用浅染，稍浅染，深染及消失加以描述；或用光密度扫描仪测定。
血脂、脂蛋白及载脂蛋白的临床应用（节选）
血脂水平升高达一定程度时即为高脂血症或高脂蛋白血症。
按血浆脂蛋白异常，可将高脂血症分为以TC升高为主、TG升高为主和混合型。按病因可分为原发性和继发性两大类。
原发性者为遗传性脂代谢紊乱疾病，按脂蛋白升高的类型不同分为6型，见表27-1。
继发性者是继发于其他疾病如糖尿病、酒精中毒、肾病、甲状腺功能减退、肝脏疾病和药物因素如应用噻嗪类利尿药等。
表 27-1 高脂蛋白血症的分型
分型 | 脂蛋白变化 | 脂质变化 |
Ⅰ | CM↑ | TC↑ TG↑↑↑ |
Ⅱa | LDL↑ | TC↑↑ |
Ⅱb | VLDL、LDL ↑ | TC↑↑ TG↑↑ |
Ⅲ | IDL↑ | TC↑↑ TG↑↑ |
Ⅳ | VLDL↑ | TG↑↑ |
Ⅴ | CM、VLDL↑ | TC↑ TG↑↑↑ |
1988 美国胆固醇教育计划 ATP I
欧洲动脉粥样硬化学会指南
1993 美国胆固醇教育计划 ATP II
欧洲动脉粥样硬化学会指南
1997 中国血脂异常防治建议
2001 美国胆固醇教育计划 ATP III
2004 NCEP ATP III的最新报告
ATP I列出了标准
高LDL-C≥160mg/dL
边缘性高LDL-C130～159mg/dL
2种以上危险因子者冠心病的一级预防方针
ATP II
提出已患冠心病者的LDL-C目标：<100mg/dL
ATP III
集中于多种危险因子病人的预防
