食用菌灭菌器
高压灭菌前,灭菌锅内需加水至水位标记高度,不能过多或过少。将培养基等物品装入灭菌锅时,物品必须排放有序,且不可过密,也不可过于靠近灭菌锅内壁,避免热蒸汽流通不畅,影响灭菌效果。试管、菌种瓶或栽培袋上面应覆盖报纸或防水油纸,防止冷凝水打湿棉塞。拧紧锅盖,开始加热,先排除锅内的冷空气,可以采用缓慢放气或集中放气的方法,之后再开始升压。最关键是冷空气必须排放完全,若灭菌锅内残留有冷空气,会造成设备现实的蒸汽压力失真,致使灭菌不彻底。
高压灭菌器
(二)常压蒸汽灭菌:常压蒸汽灭菌是将待灭菌物品放在常压灭菌灶内,以自然压力的蒸汽进行灭菌的方法,广泛用于原种、栽培种培养基和栽培袋的灭菌。常压蒸汽灭菌的缺点是时间较长,培养料养分损失较多,热效率低,能源消耗量大。常压蒸汽灭菌通常灭菌温度在97~105℃,灭菌时间在10h以上。常压蒸汽灭菌所需的时间,因灭菌材料和容量不同等而存在较大差异。常压灭菌灶装量适中、热蒸汽畅通时,冬天需要灭菌8~10h,夏天需要灭菌10~12h;装量较多或菌袋较大时,需要灭菌12h以上。刚开始灭菌时,火力要猛,使物料尽快升温,并随时观察仓内温度;当温度上升到接近100℃时开始计时,之后始终保持火力和温度稳定。及时向蒸汽锅或炉内加热水,切勿加冷水。维持蒸汽温度到所需时间,停火后闷6~8h,待温度自然下降到50℃左右时取出灭菌物品,放入预先消毒的冷却室中。
常压蒸汽灭菌炉
(三)火焰灭菌:火焰灭菌是将能耐高温的器物直接在火焰上烧灼,使附着在物体表面的微生物死亡。在食用菌制种中,最好先将接种针、接种钩、接种铲等待灭菌的部分先用酒精擦洗,再放在酒精灯火焰上灼烧数秒钟,即可达到灭菌目的。
火焰灭菌
(四)干热灭菌:干热灭菌是利用加热的高温空气进行灭菌的方法少量物品的热灭菌通常在电热鼓风干燥箱内进行,先将事先洗涤晾千或烘*培养皿、移液管等器皿用纸包好,放入干燥箱内;然后关门,接通电源,调节温度旋钮,开始加热,使温度逐渐上升至160~170℃,恒温保持2h,切断电源;待温度降至70℃以下时,方可打开箱门。应注意干燥箱内物品之间留有空隙,以便于箱内空气流通。切勿在高温时开门,以免因氧气突然进入箱内而引起明火,或因突然降温导致玻璃器皿破裂。干热灭菌仅适用于制种中能耐高温的玻璃器皿、瓷器及金属器械等灭菌,不适用于含液体的培养基等材料。如果灭菌物品用纸包裹或带有棉塞时,必须严格控制温度不超过170℃,以免烤焦纸包裹和棉塞而引起火灾。