3.3 黄酮类
3.3.1 金丝桃苷
金丝桃苷化学名为槲皮素-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷，是从刺五加叶分离出来的第1个黄酮类化合物，属于黄酮醇类。刺五加各部位均含有黄酮类化合物，叶中含量最高，在刺五加叶中金丝桃苷的平均质量分数为0.037 6%[33-34]。金丝桃苷具有抑癌、抗氧化、抗抑郁、保护心/脑缺血、保肝和免疫调节等作用[35]。
金丝桃苷可促进机体非特异性免疫功能。在体外实验中发现，金丝桃苷可通过显著增加T淋巴细胞的增殖能力，从而增强机体的特异性免疫功能[36]。此外，研究发现小剂量金丝桃苷增强体液免疫作用效果最佳[36]。胡小艳等[37]研究发现金丝桃苷还能提高免疫抑制小鼠体内各项免疫指标，如胸腺指数、脾脏指数等，以上结果提示金丝桃苷具有免疫增强作用。金丝桃苷可降低免疫抑制小鼠体内过氧化物MDA、H2O2水平，提高过氧化物酶、总超氧化物歧化酶（Total Superoxide Dismutase，T-SOD）活性及总抗氧化力，从而发挥清除机体过氧化物的作用；金丝桃苷还可通过降低黄嘌呤氧化酶活性，减少过氧化物的产生，提高小鼠抗氧化能力，达到免疫增强作用。
金丝桃苷对非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）具有一定作用，金丝桃苷在促进T细胞对H1975细胞的*伤作用的同时，可降低NSCLC细胞中c-Myc（cellular-myelocytomatosis viral oncogene）的蛋白表达量，在转录水平抑制程序性死亡-配体1（programmed cell death-ligand 1，PD-L1）的表达，显示出抗非小细胞肺癌的作用[38]。上述结果提示，金丝桃苷在肿瘤免疫治疗中可发挥一定作用，并对机体起免疫调节作用（图4）。
3.3.2 槲皮素
槲皮素为黄酮类化合物，广泛存在于刺五加的果实和叶中[8]。槲皮素是天然的抗氧化剂，可调节许多细胞内和细胞外信号通路，并发挥抗炎、抗病毒、抗癌和防治心脑血管疾病的作用[39]。
在对系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）模型小鼠的研究中，槲皮素可提高SLE小鼠脾脏树突状细胞和Th1细胞比例，减少Th2细胞比例，从而增强SLE小鼠细胞免疫功能[40]。还有研究报道，槲皮素可有效改善因环磷酰胺造成的小鼠免疫低下状态[41]。对槲皮素的抗炎免疫机制进一步研究发现，槲皮素是COX-2的选择性抑制剂，能抑制T、B细胞的增殖，并且抑制T细胞分泌TNF-α、IL-6、INF-γ[42]。此外，Veith等[43]也发现，槲皮素可抑制NOS、COX-2和C反应蛋白的表达，从而发挥抗炎作用。
Zhang等[44]报道，槲皮素能够抑制NF-κB通路和核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族pyrin结构域蛋白3（nucleotide binding oligomerization domain-like receptor family pyrin domain protein 3，NLRP3）炎性小体的激活，缓解大鼠下丘脑炎症，从而改善大鼠下丘脑的胰岛素信号传导缺陷，同时可减少炎症因子IL-6、TNF-α和纤溶酶原激活物抑制因子（plasminogen activator inhibitor-1，PAI-1）的表达，降低肾组织的炎症反应，发挥抗纤维化功能，对肾组织起到保护作用。因此，槲皮素作用广泛，对机体免疫起到显著的调节作用（图4），也为非小细胞肺癌、卵巢癌和宫颈癌等疾病的临床免疫治疗提供了新的方向。
3.3.3 芦丁
芦丁主要分布在刺五加的叶和根茎中[8]，是刺五加中含量最丰富的黄酮类化合物之一，有文献报道，在伊春带岭区产出的刺五加叶中芦丁的质量分数可达4.6%[45]。
已有研究证明芦丁可以通过细胞免疫和体液免疫2方面机制增强机体的免疫力。在环磷酰胺处理的大鼠中，芦丁可显著增加大鼠血凝试验抗体滴度，升高免疫球蛋白水平并增强迟发型超敏反应。芦丁还可恢复环磷酰胺处理后的大鼠的白细胞数量，并增强巨噬细胞的吞噬指数[46]。此研究表明，芦丁具有免疫调节的潜力。
Nafees等[47]研究报道，环磷酰胺处理后的大鼠在芦丁的作用下，可改善环磷酰胺所导致的肝毒性，并观察到TNF-α、IL-6水平下调，以及肝脏中p38酪氨酸激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）、NF-κB、iNOS和COX-2的表达降低。这说明芦丁对环磷酰胺诱导的大鼠肝脏具有保护作用。最近又有研究报道，芦丁能够通过介导TLR4-MyD88-肿瘤坏死因子受体相关因子6（tumor necrosis factor receptor-associated factor 6，TRAF6）-NF-κB炎症信号通路，调节细胞因子和炎症介质，发挥抗炎作用[48]。上述研究提示，芦丁可改善机体免疫低下的状态，并通过调节细胞因子分泌和保护免疫器官，发挥对小鼠免疫功能的调节作用（图4）。
3.4 香豆素类
异嗪皮啶是一种羟基香豆素类单体物质，广泛存在于刺五加的根茎、叶和果实中，具有多种生理和药理活性[8,49]。异嗪皮啶具有抗肝癌、抑制人结直肠癌细胞增殖、治疗神经退行性疾病的作用，并对高脂饮食诱导的脂代谢紊乱和非酒精性脂肪肝起保护作用[49-50]。
在免疫作用方面，异嗪皮啶主要发挥抗炎作用。Niu等[51]通过二甲苯和卡拉胶诱导的小鼠耳水肿和足肿胀模型显示，异嗪皮啶主要通过抑制小鼠腹腔巨噬细胞和血清中TNF-α水平，降低小鼠腹腔巨噬细胞中磷酸化p38和细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase，ERK）1/2蛋白的表达，调节MAPK信号通路以抑制炎症。而后续研究表明，异嗪皮啶能降低血清中的炎症介质和细胞因子，包括NO、iNOS、COX-2、前列腺素E2（prostaglandin E2，PGE2）、TNF-α和IL-6水平，可减轻IL-1β诱导的神经细胞前体炎症并对LPS诱导的急性肺损伤具有保护作用[52]。
此外，异嗪皮啶还能抑制IL-1β对基质金属蛋白酶-3（matrix metalloproteinases-3，MMP-3）和MMP-13的诱导作用，同时抑制血小板反应蛋白解整合素金属肽酶-4（a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin-4，ADAMTS-4）和ADAMTS-5的表达，增加蛋白聚糖和II型胶原的聚集水平；又能显著抑制IL-1β诱导的IκB-α降解和NF-κB活化，调节NF-κB信号通路，抑制骨关节炎（osteoarthropathy，OA）的发展[52-53]。
免疫共沉淀研究还发现，异嗪皮啶可竞争性结合髓样分化蛋白-2（myeloid differential protein-2，MD-2），显著减弱TLR4和MD-2之间的相互作用，抑制MyD88、IL-1受体相关激酶-1（interleukin-1 receptor associated kinase 1，IRAK-1）和TRAF-6的表达，抑制Toll信号通路和NF-κB的激活，促进细胞增殖，提示异嗪皮啶可能是OA的潜在治疗药物[54]。Chen等[55]的最新研究还表明，异嗪皮啶可作为NLRP3炎性小体抑制剂减轻心肌梗死程度并对糖氧剥夺损伤的心肌产生保护作用。
综上所述，异嗪皮啶具有一定的抗炎作用，其机制主要与降低炎症介质和细胞因子含量、调节MAPK信号通路和NF-κB信号通路、抑制Toll信号通路有关（图5）。上述研究表明异嗪皮啶可能是治疗炎症相关疾病如神经前体细胞炎症、骨关节炎和急性肺损伤等的潜在药物。
4 结语与展望
临床导致免疫低下的情况呈现多样化趋势，其中术后免疫力低下导致多种并发症的发生较为常见，且预后极差甚至导致患者死亡。随着化学药的耐药性以及副作用问题的频发，刺五加作为一味传统中药再次受到关注。《本草纲目》记载刺五加具有“补中益气，坚筋骨，强意志，久服轻身耐老”的功效。基于此记载，临床上常将刺五加用于病后恢复、改善睡眠和刺激机体免疫力，并能一定程度上治疗两脚疼痹风弱、水肿和心律失常。
刺五加提取物及有效成分的体内外实验均证明刺五加具有一定的免疫调节作用，并可通过多种途径发挥作用（表1）。刺五加多靶点的药理活性有望使其成为临床增强免疫力的潜在药物，但目前对于刺五加提取物及有效成分免疫作用的研究大部分处 于基础性研究阶段，缺乏相应的临床实验数据，因此，仍需对其作用机制进行深入研究以及有效解决临床新药的开发利用。同时刺五加的种类繁多，各部位成分的组成和含量各不相同，如何进行标准化配比也成为一个亟待解决的问题。综上所述，刺五加免疫作用的开发虽具有良好的应用前景，可为未来的免疫疗法提供更多的选择，但仍有许多问题需要解决。
利益冲突 所有作者均声明不存在利益冲突
参考文献（略）
来 源：梁子涵，王旖瑶，赖逸翔，张靖怡，宋银宏．刺五加提取物及其活性成分免疫调节作用的研究进展 [J]. 中草药, 2022, 53(15): 4895-4904 .
