包括kan、hph、nat和bsd，它们分别对抗生素遗传素（G418）、潮霉素B、clonNAT和*稻瘟菌素S产生耐药性，这些选择标记可以帮助鉴定和筛选出具有所需*结构的菌落。
为了将选择标记基因通常放置在GOI的终止子之后，我们制备了一组包含Tadh1和串联对齐的选择标记的模块。
第四组的模块包括Tadh1 kan（#20）、Tadh1 hph（#21）、Tadh1 nat（#22）和Tadh1 BSD（#23），这些模块被称为终止子 标记（DE）模块，其两侧具有内聚的末端“d”和“e”。
不带终止子的选择标记模块（IVb.标记（ge））的两侧具有内聚末端“g”和“e”。
我们提出了六个不带GOI终止子的选择标记模块：kan（#25），hph（#26），nat（#27）和bsd（#28），以及ura4（#29）和LEU2（#30）（分别赋予尿嘧啶和亮氨酸自养）。
目标模块靶模块包含用于诱导庞贝链球菌细胞同源*的序列，其中的序列“z2”（#32）来自II染色体上的一个特定区域。
“lys1”（#33）和“arg1”（#34）分别来源于内源性lys1基因（染色体I）和arg1基因（染色体III）。
为了诱导*，我们在靶模块的中间放置了限制性内切酶位点FseI，通过用FseI酶切整合质粒，将其线性化，有效地将其定向到体内同源序列以诱导*。
为了确保FseI位点在整合质粒中是唯一的，以避免整合质粒在酶切后多次切割，我们特意选择了具有8碱基识别序列的FseI酶，这样做可以最大限度地降低*过程中的风险。
