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首页 > 实用技巧 > 作者:YD1662023-12-04 17:03:08

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文丨未来缪斯

编辑丨未来缪斯

引言

生物活性的赤霉素(GAs)是植物生长和发育的中心调节因子,包括种子发育,通过复杂的生物合成和降解途径实现GA的内稳态,其中具体的活性尚待阐明。

从成熟或浸泡的黄瓜种子中分离了两个与已知GA 3-氧化酶具有高度序列相似性的cDNA,其中一个酶(在此称为CsGA3ox5)具有GA 3-氧化活性。

第二个酶(在此称为CsGA1ox/ds)执行多个反应,包括GA的1β-氧化和9,11-脱饱和反应,但缺乏3-氧化活性。

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在拟南芥植物中过表达CsGA1ox/ds导致严重矮化的植物,该矮化现象可以通过外源应用生物活性的GA4得到拯救,证实了CsGA1ox/ds对GAs进行降解。

将CsGA1ox/ds中的三个氨基酸Phe93、Pro106和Ser202替换为通常在GA 3-氧化酶中保守的Tyr93、Met106和Thr202,使得CsGA1ox/ds获得了GA 3-氧化活性,因此增强了其生成生物活性GAs以及降解产物的能力。

表达这种经氨基酸修饰的GA1ox/ds变体在拟南芥中加速了植物的生长和发育,表明这个酶变体能够在植物体内产生生物活性的GAs。

将这三个保守的GA 3-氧化酶氨基酸在GA3ox5中进行遗传修饰,改变为CsGA1ox/ds中存在的氨基酸,导致该变体无法将GA9转化为GA4,突显了这三个保守氨基酸对于GA 3-氧化酶活性的重要性。

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Gibberellins(GAs)通过复杂的途径进行生物合成,以调节植物的生长和发育,并对环境做出响应。

在黄瓜等瓜果类植物中,与拟南芥一样,GA4是在大多数发育阶段中主要的生物活性GA,对于植物中的GA内稳态,GA生物合成和GA去活化的调节都非常重要

GA生物合成涉及几类酶,包括萜类环化酶,细胞色素P450单加氧酶,以及作为最后步骤的2-氧戊二酸依赖的双氧酶(2-ODD)。

GA降解也涉及几类酶,包括GA-甲基转移酶细胞色素P450单加氧酶,以及再次是2-氧戊二酸依赖的双氧酶。

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