C20-GA前体GA12不被该酶转化,黄瓜的CsGA1ox/ds将GA12转化为两种主要的化合物,其身份尚不清楚。从它们的质谱中,化合物a代表单不饱和GA12,而化合物b代表单不饱和羟基GA12。
这种酶还将GA9羟化为1β-羟基GA9(GA61),并形成一个未知身份的化合物c,从其质谱来看,代表单不饱和羟基GA9二酸。通过对CsGA1ox/ds裂解液浓度的增加孵育,表明化合物c首先产生,随后是GA61。
CsGA1ox/ds将植物激素GA4转化为单不饱和GA4(GA88)和未知身份的化合物d。从其质谱中,化合物d与C/D重排的二羟基GA4相似。
GA88和化合物d之间的比例在孵育中CsGA1ox/ds裂解液浓度增加或在铁限制条件下都没有改变,表明这两种产物可能直接由GA4催化。
CsGA1ox/ds对于2-氧戊二酸和抗坏血酸具有典型的辅酶要求;在孵育混合物中不添加辅酶,底物(包括[14C]GA12,[14C]GA9和[14C]GA4)都不会转化。
CsGA1ox/ds对2-氧戊二酸和铁的存在具有绝对要求,并且其活性在Fe2 存在时受到刺激,在EDTA螯合铁后,对Fe2 的要求变得绝对,这种多功能2-ODD最好被描述为GA 1-氧化酶/脱饱和酶。
经过氨基酸序列比对,发现CsGA1ox/ds蛋白与GA 3-氧化酶蛋白家族密切相关。
在黄瓜中胚种发育期间,CsGA3ox5和CsGA1ox/ds两个基因的表达是特异性的,此时不会表达GA 2-氧化酶。
成熟种子中内源性的化合物c的存在进一步表明CsGA1ox/ds在种子发育过程中发挥功能。除了之前描述的黄瓜(Cucumis sativus)成熟种子中的内源性GA(12)外,还发现了几种2β-羟基化的赤霉素(gibberellins)。
这与种子发育后期GA 2-氧化酶的表达相关,赤霉素 3-氧化酶是研究较为充分的酶,对植物发育有重要作用,它们催化赤霉素生物合成的最后一步,产生赤霉素植物激素。
GA 1-氧化酶/脱饱和酶在植物中对赤霉素激素池的调控功能尚不清楚,在拟南芥中过表达CsGA1ox/ds导致转基因植株表现出类似于过表达GA 2-氧化酶或脱饱和的南瓜GA 20-氧化酶(CmGA20ox1)的表型。
这样的表型(极度侏儒、晚花、叶片深绿)是缺乏赤霉素植物的典型特征,揭示了CsGA1ox/ds对赤霉素稳态的脱饱和功能。
在CsGA1ox/ds过表达线中,所有GA的水平,包括前体GA12、GA15、GA24、生物活性GA4和脱饱和物GA34,与对照植株过表达空载体的情况相比都非常低。
从系统发育学上看,两者都归类为GA 3-氧化酶家族,CsGA3ox5的催化性质与典型GA 3-氧化酶的性质密切相关。