由于TCs能与很多金属离子发生螯合作用，为了提高CE的选择性和分离性能，近来非水溶性毛细管电泳（non-aqueous capillary electropHoresis，NACE）被用来进行动物源性食品中TCs残留的检测分析（图5-31），这一CE的电解质溶液为50mmol/L醋酸镁的N-甲基甲酰胺溶液，并选择镁离子作为增强TCs的荧光强度的螯合离子，结果表明，以有机溶剂替代水溶液的电解质溶液可增强TCs的荧光强度，提高CE的检测能力。Hernandez等用HLB固相萃取柱将猪血清净化后，以NACE分析猪血清中的OTC，以含25mmol/L乙酸钠、26mmol/L甲磺酸、1mmol/LEDTA的甲醇溶液-乙腈（50∶50，V/V，pH4.0）为电解质溶液，检测限为0.2～0.3mg/L，回收率为74%～100%。
6.3 高效液相色谱法（HPLC）
反向液相色谱（LC）操作简单、方法灵活，已成为包括TCs在内的许多药物残留检测的主要分析手段。在普遍使用的硅胶基反向键合相（C18、C8等）固定相表面存在残存的硅醇基或金属离子（如铁离子、铝离子），而TCs易与金属离子螯合，反向柱残存的硅醇基与TCs可以通过氢键或离子交换作用，导致色谱峰拖尾，保留值不稳定或过长，出现峰形异常和分离度下降。
近年来，很多学者将PLRP-S聚合色谱柱、Novapak苯基柱、Pursuit联苯基柱、Discovery氨基C16色谱柱、端基封闭处理的填料制备的色谱柱等运用到TCs残留的分析工作中。氨基C16色谱柱由于表面不存在硅烷骨架，所以能够避免TCs与硅醇基和金属离子的干扰作用。Rupp等发现联苯基柱较单纯苯基柱有更好的保留效能。PLRP-S聚合色谱柱为苯乙烯-二乙烯苯共聚物（PS-DVB），是一种有机高分子基质反向填料，不存在由硅胶基反向填料残存的硅醇基和金属离子导致的酸性或碱性药物色谱峰拖尾等问题，流动相组成简单，对pH和水具有更好的耐受性。PLRP-S聚合色谱柱或PS-DVB能够减少为获得满意的色谱峰形而优化流动相的大量工作，而日益被广泛应用。
为避免形成金属螯合物和在反向LC色谱柱上的吸附，在反向LC中，优化流动相的组成是TCs残留检测的重要方法之一。通常在流动相中加入有机酸（如磷酸、草酸、柠檬酸、酒石酸、EDTA等）、有机改性剂（甲醇、乙腈等）、离子对试剂、掩蔽剂或扫尾剂等，以加草酸为多数。草酸能与金属离子螯合，有效地消除金属离子对TCs残留分析的干扰；另外，含有001mol/LEDTA的流动相可以有效避免TCs与残存的金属离子形成螯合物。
已报道的TCs残留的各种HPLC检测方法见表5-25这些分析方法的流动相pH通常为2～3.6，流动相的组成以低有机改性剂、高酸性水相溶液为共同的特点。
分析TCs残留时，流动相通常由乙腈和缓冲液组成，甲醇有时与乙腈共同作为有机改性剂使用。有机溶剂的成分、比例的选择比水相的组分、离子强度、柱温等因素对TCs的分离起更重要的作用。
为了改善TCs与硅胶基反向固定相的作用性质，防止拖尾，获得适宜的保留行为，在流动相中还加入辛磺酸、四丁基氯化铵、七氟丁酸、四丁基硫酸化铵、SDS等离子对试剂以获得更好的保留能力。在酸性流动相中，离子对试剂添加浓度一般为1～5mmol/L，浓度过高易发生簇集。
TCs具有较强的紫外吸收和荧光性质，且TCs的光谱性质很相似。由于TCs在中性或碱性介质（pH＝6.5～7.5）中，并有金属离子镁离子、钙离子、铜离子、铝离子等存在发生螯合时，才表现较强的荧光性质（λex＝380～390nm，λem＝490～520nm），故绝大多数TCs残留分析中使用的是的紫外检测法，仅有少数方法使用荧光检测法。
UV的检测波长为270nm和360nm，酸性的流动相（草酸缓冲液、磷酸缓冲液、乙酸缓冲液、草酸、磷酸、乙酸柠檬酸、高氯酸、三氟乙酸等）可作为离子抑制剂减少基质的干扰。在多残留分析中，近年来还采用二极管阵列检测器（DAD），以获得更好的波长分辨率和更高的灵敏度。Cinquina等以0.01mol/L草酸-甲醇-乙腈（60∶25∶15，V/V）为流动相（流速为1mL/min），PAD检测波长为365nm，对牛奶和牛肌肉组织中的OTC、TC、CTC、DC残留进行了检测，以100mg/kg添加，牛奶和牛肌肉的平均回收率分别为81%、82.3%，RSD小于5.8%（图5-32）。
