as的潜在靶点,as模型向上倾斜的原因

首页 > 上门服务 > 作者:YD1662023-12-26 23:26:27

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)发病机制尚未完全明确。

近年研究发现由免疫细胞活化所介导的炎症反应在AS的进程中具有重要的意义。

提示抑制机体免疫系统活化所诱发的炎症反应具有延缓AS进程的潜在临床应用价值。

细胞程序性死亡配体-1(programmedcelldeathproteinligand-1,PD-L1)又称B7-H1,属于B7家族中的Ⅰ型跨膜糖蛋白,通过与T细胞膜上的PD-1结合,抑制T细胞增殖和活化,在维持机体免疫稳定中发挥关键作用。

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然而,PD-L1表达与AS临床病理学特征和预后的关系尚存在争议。

本研究通过体内外实验证实抗PD-L1单抗促免疫细胞活化加重AS。

通过探讨PD-L1功能改变与AS的相关性,为AS的发生发展相关病理机制研究提供新方向。

同时也为合并有心血管疾病的肿瘤患者的免疫治疗提供指导建议。

C57BL/6J遗传背景的载脂蛋白E基因敲除小鼠(ApoE-/-)购自南京君科生物工程有限公司,雄性,清洁级,8周龄,体质量(22±2)g。

实验动物饲养于哈尔滨医科大学药理学实验动物中心。

本实验通过哈尔滨医科大学附属肿瘤医院伦理委员会批准(KY2016-16)。

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抗PD-L1单抗(Cat#BE0101,Univ-Bio,中国)、油红O染料(Cat#GP1067,武汉塞维尔公司);HE染料(Cat#GP1031,武汉塞维尔公司)。

TNF-α(Cat#SP13726)、IFN-γ(Cat#SP13777)、IL-4(Cat#SP13757)、IL-13(Cat#SP13766)和IL-1β(Cat#SP12667)ELISA试剂盒均购自赛培生物(武汉)。

总胆固醇(CHO,Cat#A111-1-1)、三酰甘油(TG,Cat#A110-1-1)、高密度脂蛋白(HDL-c,Cat#A112-1-1)和低密度脂蛋白(LDL-c,Cat#A113-1-1)均购自南京建成。

CD3(Cat#100306)抗体、CD4(Cat#10421)抗体和CD8(Cat#100734)抗体均购自Biolegend。

高脂饲料购自北京科奥(蔗糖20%,猪油15%,胆固醇1.2%,胆酸钠0.2%,酪蛋白10%,磷酸氢钙0.6%,石粉0.4%,预混料0.4%,基础饲料52.2%)。

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倒置显微镜(日本Nikon),微型低速离心机(中国奥盛仪器),水平摇床(北京恒奥生物)酶标检测仪(美国BioTek),涡旋振荡器(中国科大创新)。

32只ApoE-/-小鼠随机分成4组,普通饲料喂养组(normaldiet,ND),高脂饲料喂养组(highfatdiet,HFD),普通饲料喂养并给予抗PD-L1单抗组(ND Anti-PD-L1,100mg·kg-1,腹腔注射,一周2次),高脂饲料喂养给予抗PD-L1单抗组(HFD Anti-PD-L1,100mg·kg-1,腹腔注射,一周2次)。

喂养10周后,使用二氧化碳过量麻醉法处死小鼠。

快速分离动脉(包括左右颈总动脉、左锁骨下动脉、主动脉至腹主动脉)。

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