原生质体的鉴定方法,原生质体融合的五种方法

（M. importuna）的单交配型同核体，目前还未见采用原生质体技术对六妹羊肚菌交配型（mating type，MAT）进行分离的研究报道。

本研究对六妹羊肚菌（M. sextelata）原生质体进行制备及再生。

且对分离后的原生质体再生菌株的交配型进行分子生物学鉴定，并对其交配型稳定性进行验证试验，以期实现羊肚菌交配型的有效分离，对六妹羊肚菌的遗传育种具有重要意义。

1.1材料与试剂

1.1.1菌株与引物

栽培种分离的六妹羊肚菌（Morchella sextelata）：微生物工程重点实验室分离、保存。

交配型基因的上游引物（P6-1F、P8-4F）及下游引物（P6-1R、P8-4R）的序列，其中引物对 P6-1F/P6-1R用于检测交配型MAT1-2-1基因，引物对P8- 4F/ P8-4R用于扩增交配型MAT1-1-1基因。