再生培养条件：CYM再生培养基平板正立静置30 min后封口膜封口、24 ℃倒置培养65～120 h，采用血球计数板进行原生质体计数，观察原生质体的再生情况并计算回收率及再生率，其计算公式如下：
原生质体回收率=酶解液中的原生质体数（个）×酶解液体积（mL）× 100%浓缩液中的原生质体数（个）× 体积（mL）原生质体再生率=每个再生培养基平板上的原生质体再生菌落数（个）× 100%每个再生平板涂布的原生质体数（个）
1.3.3原生质体再生菌株的分离及其交配型的鉴定
（1）原生质体再生菌株的分离
小心挑取CYM再生培养基平板上出现的单菌落至 PDA培养基斜面上，编号后置于24 ℃生化培养箱中培养 7～14 d。
或对经紫外诱变（原生质体稀释溶液于18 W紫外灯下距离32 cm处照射30 s）原生质体再生单菌落进行编号，并将单菌落接种于PDA培养基斜面进行培养后，于4～12 ℃冰箱保藏。
1.1 六妹羊肚菌原生质体的制备和再生六妹羊肚菌原生质体浓度达（0.6～4.5）×105个/mL（CYM液体法）或（2.2～4.5）×106个/mL（玻璃纸CYM平板法），原生质体直径在2～6 μm之间；
